本文通過(guò)mIHC多重?zé)晒饷庖呒夹g(shù)和多光譜成像技術(shù)(MSI)分析了不同類(lèi)型晚期甲狀腺癌的免疫圖譜，通過(guò)挖掘腫瘤微環(huán)境中的寶貴信息，幫助我們?nèi)ミx擇免疫治療的候選者。 
研究者針對(duì)收集的12例伴有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的DTC患者和16例ATC患者的28份組織樣本，使用mIHC和MSI評(píng)估分析細(xì)胞表面因子CD 4、CD8、PD-1、PD-L1、Foxp3和細(xì)胞角蛋白CK（圖1A），再結(jié)合腫瘤比例評(píng)分法（TPS）和聯(lián)合陽(yáng)性評(píng)分法(CPS)評(píng)估關(guān)鍵因子PD-L1的表達(dá)。 

圖1.特征性細(xì)胞表面標(biāo)志物的多光譜圖像和表達(dá)情況 
（A）代表性晚期甲狀腺癌共定位結(jié)果；
（B）CD4, CD8, PD-1, PD-L1, Foxp3和CK不同顏色單染以排除交叉反應(yīng)； 
（C）PD-L1在不同樣本中的表達(dá)情況，驗(yàn)證mIHC與常規(guī)方法的一致性 
 

結(jié)果（圖2）顯示甲狀腺未分化癌ATC組中PD-L1陽(yáng)性的腫瘤細(xì)胞顯著多于分化型甲狀腺癌DTC組（每平方毫米183.5 vs. 0.03, P < 0.001）。

圖2. 基于病理亞型的表達(dá)PD-L1的腫瘤細(xì)胞數(shù)量比較

與DTC組相比，ATC組中淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)顯著增加（1,138 [67.15–2,731] vs. 84.05 [0–300.9], p < 0.05），并且ATC中PD-L1或PD-1陽(yáng)性淋巴細(xì)胞顯著多于DTC（圖3A）。圖3B和圖3C則分別表明ATC組中細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞（370.7 [38.19–2,327] vs. 18.97 [0.99–169.1] , p < 0.05）和Tregs（263.8 [26.9–1,499] vs. 14.15 [0.34–188.0], p < 0.05）均顯著多于DTC組。

圖3. DTC和ATC組中T淋巴細(xì)胞及其亞型的數(shù)量比較
 

此外，研究者進(jìn)一步結(jié)合腫瘤比例評(píng)分法（TPS）和聯(lián)合陽(yáng)性評(píng)分法(CPS)評(píng)估了關(guān)鍵因子PD-L1在不同類(lèi)型甲狀腺癌樣本中的表達(dá)。TPS和CPS的具體定義如下，PD-L1陽(yáng)性和高表達(dá)的臨界值在TPS和CPS中分別為1和50，以及1和20。

結(jié)果顯示，在所有DTC樣本中PD-L1表達(dá)的TPS和CPS結(jié)果均為陰性，而在ATC樣本中陽(yáng)性占比則分別高達(dá)81%和94%（圖4），并且PD-L1高表達(dá)的比例分別有6%和44%。

本文研究人員主要通過(guò)mIHC多色方法評(píng)估分析了不同晚期甲狀腺癌的免疫圖譜，聚焦PD-L1表達(dá)及淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)情況。研究發(fā)現(xiàn)相較于伴有遠(yuǎn)端轉(zhuǎn)移的分化型甲狀腺癌DTC組，甲狀腺未分化癌ATC組PD-L1陽(yáng)性更高，并且具有更多PD-1/PD-L1陽(yáng)性的浸潤(rùn)性淋巴細(xì)胞。文章揭示了靶向PD-L1的免疫治療可能是一種針對(duì)甲狀腺未分化癌ATC的有效治療策略。

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