293細胞是人腎上皮細胞系，包含多種衍生細胞株如AAV293、HEK293、293T、 293F、293A等。由于293細胞以下特點：①.293細胞比較容易轉染；②擁有人類所有的翻譯后修飾，能夠產生與人類自然合成的蛋白質最相似的蛋白質；③.293細胞是用于制藥生產的大規(guī)模培養(yǎng)的理想宿主細胞；④.具有高生長速率、搖瓶中細胞密度高、高效靈活的代謝和遺傳操作等優(yōu)點，是生物治療藥物生產的可行工具；⑤是一種敏感的人類胚胎細胞，具有與早期分化神經元相似的特征，在體外更容易受到環(huán)境因素的影響，通常被用作新藥發(fā)現和毒性測試的模型，293細胞被廣泛用于重組治療蛋白、疫苗、抗癌劑和其他臨床相關藥物的生產研究，因此獲得“工具細胞"、“21世紀最有前途的細胞"等稱號。

圖1 293細胞形態(tài)

表1 293細胞基本信息

愛必信最新推出的RF 293細胞DNA轉染試劑可專用于293細胞的質粒DNA轉染，轉染陽性率可高達95%以上。特別地，RF 293細胞DNA轉染試劑盒擁有極低的細胞毒性，轉染細胞24小時后，細胞死亡率僅為5%左右。同時該試劑盒操作十分簡便，先將轉染試劑與質粒DNA混合，再將轉染試劑-DNA復合物直接加入培養(yǎng)細胞中即可，血清不影響其轉染效果，不必刻意添加或更換培養(yǎng)液。

細胞轉染性能： 可高效轉染293細胞，包括AAV293 、HEK293、293T、293F、293A，轉染效率可高達95%。

極低的細胞毒性：使用可降解生物材料，細胞毒性低，轉染細胞死亡率在5%左右，大大降低了因細胞毒性對實驗結果的影響，實驗結果更為客觀。

操作簡便：可用于含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞的轉染，轉染前后不需要更換培養(yǎng)液。

圖2 RF 293細胞DNA轉染試劑轉染pEGFP-C2質粒到AAV-293細胞，綠色熒光蛋白的表達情況

1、轉染前的細胞匯合度以60-70%為宜，轉染時細胞生長狀態(tài)應保持良好，不要有支原體污染。

2、轉染，建議進行優(yōu)化實驗，如24孔培養(yǎng)板，每孔質粒用量0.8 ug，轉染試劑用量可選擇2.0 ul、2.5 ul、3.0 ul進行優(yōu)化。

3、應避免轉染復合物制備體系中存在血清，因血清會干擾RF 293質粒與DNA形成復合物，培養(yǎng)基中盡量不要使用抗生素。

4、對于24孔板，轉染前一天接種的細胞量以1.5-2.5X105個/孔為宜，建議研究者進行適當的優(yōu)化。

Absin特色產品線：

WB相關：ECL發(fā)光液、預染marker、預制膠；IHC相關：二抗試劑盒、組化筆；IP/CoIP試劑盒；激動劑/抑制劑；血清、BSA、蛋白酶K、CTB、TTX、CEE；凋亡試劑盒；呼吸爆發(fā)試劑盒；ELISA試劑盒；重組蛋白；抗體: 二抗、標簽抗體、對照抗體；定制服務(抗體/多肽/蛋白/標記/檢測)...