技術(shù)原理：

多重熒光免疫組化（mIHC），主要的技術(shù)原理來自TSA技術(shù)，TSA即酪酰胺信號放大（Tyramide signal amplification）是一類利用辣根過氧化酶（HRP）對靶蛋白或核酸進行高密度原位標記的酶學檢測方法。該技術(shù)可與高性能染料Alexa Fluor®、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測系統(tǒng)相兼容。

TSA主要原理是利用酪胺 Tyramide 的過氧化物酶反應(yīng)（酪胺鹽在HRP催化H2O2下形成共價鍵結(jié)合位點），產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物，該產(chǎn)物能與周圍的蛋白殘基（包括色氨酸、組氨酸和酪氨酸殘基）結(jié)合，這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的生物素沉積，與隨后加入的 Streptavidin—HRP/熒光基團結(jié)合，經(jīng)幾次這樣的循環(huán)放大，可以結(jié)合大量的酶分子or熒光基團，結(jié)果使其檢測信號得到幾何級放大。

TSA多重熒光免疫組化染色示意圖

簡單來說，用這種方法做多重熒光染色是利用二抗上帶有的HRP（而不是直接偶聯(lián)熒光素），來催化后續(xù)添加入體系的非活性熒光素。該熒光素在HRP和過氧化氫的作用下被活化，跟臨近蛋白的酪氨酸殘基共價偶聯(lián)，使得蛋白樣品與熒光素穩(wěn)定結(jié)合。然后進行微波處理，前一輪非共價結(jié)合的抗體被洗掉，共價結(jié)合的熒光素還留存在樣品上。再換個一抗來第二輪孵育，周而復始。等到所有抗體孵育結(jié)束，熒光素都結(jié)合好后，最后去檢測結(jié)果。

講座主題：

多重熒光免疫組化在腫瘤免疫治療中的應(yīng)用

講座時間：

6月29日（本周四）下午15:00-16:00

講座內(nèi)容：

1、多重熒光免疫組化技術(shù)簡介；

2、多重熒光免疫組化在腫瘤靶向治療中的應(yīng)用；

3、文獻案例解析；

4、Absin多重熒光免疫組化解決方案。

報名方式：

詳見微信公眾號“愛必信生物"