檢測原理：

Mouse IL-4 ELISA Kit 本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。特異性抗小鼠 IL-4抗體預包被在高親和力的酶標板上。酶標板孔中加入標準品、待測樣本和生物素化的檢測抗體，經(jīng)過孵育，樣本中存在的IL-4與固相抗體和檢測抗體結合，形成免疫復合物。洗滌去除未結合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素(Streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物，避光顯色。加入終止液終止反應，在450 nm波長(參考校正波長540nm或570nm)測定吸光度值。

檢測類型：雙抗夾心法

形式：預包被96孔板

檢測樣本類型：細胞上清液，血清，血漿

上樣量：100ul

試劑盒組分：

Mouse IL-4 ELISA Kit  預包被96孔板、標準品、抗小鼠 IL-4檢測抗體、稀釋用緩沖液、顯色液（A、B）、洗滌液、終止液、SA-HRP、封板膜和說明書一份。

靈敏度：2.3 pg/mL

檢測范圍：15.6 - 1,000 pg/mL

回收率范圍：75-112%

保存方法：2-8℃

標準曲線圖

背景：

白細胞介素 4（IL-4） ， 又稱為 B 細胞刺激因子 1, 是一個約為 18-20 kDa 的單體細胞因子， 在免疫反應中呈多向性效應。 小鼠 IL-4 的前體有 140 個氨基酸， 包括一個 20 個氨基酸的信號肽和一個 120 氨基酸的成熟鏈。 IL-4 含有 3 個 N 鏈接糖基化潛在位點， 3 個鏈內(nèi)二硫鍵， 其結構為一個捆綁的四α-螺旋體。 與人 IL-4 相似，小鼠 IL-4 有一個小的選擇性剪切體。 與人 IL-4 不同的是， 此剪切體被認為表達很低，意義不大。 成熟的小鼠 IL-4 氨基酸序列與人和大鼠 IL-4 分別有 43%和 63%同源性。 研究顯示， 人、 小鼠和大鼠 IL-4 的活性均屬于種屬特異性。 IL-4 由趨向 Th2的 CD4+ T 細胞、嗜堿性粒細胞、肥大細胞、 NK T 細胞、γδT 細胞和嗜酸性細胞表達。

IL-4 在 2 型免疫反應中起關鍵作用， 能促進 Th2 分化和 B 細胞分泌免疫球蛋白 G1和免疫球蛋白 E 亞型。 IL-4 通過結合 I 型或 II 型受體復合物引起 Th2 分化， 該復合物含有分別與γ鏈或 IL13Rα1 偶聯(lián) IL-4 受體α亞基。 通過細胞表面 IL-4 受體的異二聚體化， 激活 JAK 族蛋白絡氨酸激酶， 引起其細胞質(zhì)內(nèi) C 端磷酸化。 從而引發(fā) STAT6 的招募和磷酸化。 隨著 STAT6 的磷酸化、 構象發(fā)生變化， 導致 STAT6的二聚體化、 核轉(zhuǎn)位、 與靶基因 DNA 結合和轉(zhuǎn)錄激活， 這些靶基因包括 IL-4、 IL-5、IL-13 以及 Th2 特異性因子 GATA3 和 c-Maf 等。在功能上， IL-4 促進小鼠 B 細胞增殖、 生存和免疫球蛋白類轉(zhuǎn)換為 IgG1和 IgE， 促進肥大細胞、 嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞的啟動和趨化， 促進幼稚 CD4+ 細胞獲得Th2 表型， 以及促進上皮細胞的增殖和活化。 在腫瘤免疫學方面， IL-4 也是一個重要細胞因子。 在早期小鼠實驗中， 研究人員發(fā)現(xiàn) IL-4 具有強大的抗腫瘤能力。 小鼠排斥表達 IL-4 的腫瘤， 形成長期的抗腫瘤免疫。 這可能是由于 IL-4 具有抗血管生成作用或激活、 選擇 CD8+ T 細胞的能力。 不可理喻的是， 新的證據(jù)顯示 IL-4是一個促腫瘤分子， 因此 IL-4 是一個具有反向作用的細胞因子。 可能的解釋是，IL-4 誘導腫瘤細胞中的抵抗凋亡分子上調(diào)， 和 CD8+ T 細胞中的溶細胞分子下調(diào)。 另外，腫瘤產(chǎn)生的 IL-4 也被認為可作用于局部腫瘤相關巨噬細胞（TAMs） ， 從而誘導促進細胞遷移的組織蛋白酶的分泌。