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使用Molecular Devices發(fā)布SoftMax Pro 7軟件進行平行線分析和相對活性評價
在生物實驗中要經(jīng)常要使用到的平行線分析(PLA)方法,當無法直接檢測一個生物制品的活性而只能通過檢測其產生的效果時,PLA方法通常會被用來進行效應曲線的比較來獲得此制品的效果(Figure1)。如果對于兩種物質其生物響應相似或者在兩種不同的生物環(huán)境中同一種物質產生相似的效應曲線時,平行線分析法可以被用來進行評價。評價平行性是計算化合物或藥物相對活性的前提,并且在很多生物應用中如藥物活性比較、分析物鑒定、交叉反應、干擾物質、基質補償、濃度估算和抑制效應等應用研究中。
當兩條曲線被判定為平行時,其中一條曲線的函數(shù)可以通過通過另一條曲線的函數(shù)乘上一個比例系數(shù)向X軸的左邊或右邊變換獲得:ƒ(x) = ƒ(rx), 其中x是劑量,r是比例系數(shù)或相對活性。對于相對活性,一般將參考品(已知品)的活性設為1,可以使用一個比例系數(shù)可以將參考品的曲線變換為測試品(未知品)曲線,那么這比例系數(shù)則被稱之為測試品的相對活性。這個方法應用于線性擬合的曲線非常合適,因為線性擬合的曲線在整個濃度范圍內的曲線斜率是保持一致的(Figure2)??墒菍τ诜蔷€性擬合曲線如4-參數(shù)和5-參數(shù)曲線,S形的濃度效應曲線在整個測試濃度范圍內具有變話的斜率值(Figure1)。
用于評價平行性的方法根據(jù)平行性假設的驗證方法不同大致可以分為兩大類:效應比較法和參數(shù)比較法。本文將對這兩大類方法進行詳細解釋和介紹怎樣使用SoftMax® Pro 7軟件進行平行性測試。我們建立了一個Protocol包括了使用F-檢驗進行F-檢驗概率測試和使用卡芳-檢驗進行卡芳概率測試。另外,對于參數(shù)比較法,根據(jù)菲勒定理我們也建立了一個Parallelism Test 的protocol放在SoftMax Pro Protocol的庫內。所有這些方法都可以被用于評價線性和非線性擬合曲線。