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elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格實驗檢測方案
閱讀:276 發(fā)布時間:2018-8-17 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格我公司成立至今,在前面的內(nèi)容中我司為大家介紹了許多相關(guān)操作方法、操作技巧、經(jīng)驗總結(jié)等,有愈多用戶反應(yīng)從中學(xué)到了不少知識。在今天的內(nèi)容中,上海谷研為大家重點講談ELISA實驗檢測方案。
一、雙抗體夾心法
1.測抗原
① 將特異性抗體與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗體。洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
② 加受檢標本,保溫反應(yīng)。標本中的抗原與固相抗體結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合物質(zhì)。
③ 加酶標抗體,保溫反應(yīng)。固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關(guān)。
④ 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。
2.測抗體
反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進行包被和制備酶結(jié)合物,以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標抗原代替酶標抗抗體。此法中受檢標本不需稀釋,可直接用于測定,因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標抗原的制備,應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同,尋找合適的標記方法。
間接法測抗體
原理:為利用酶標記的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體)以檢測與固相抗原結(jié)合的受檢抗體,故稱為間接法。
操作步驟:
1.將特異性抗原與固相載體聯(lián)結(jié),形成固相抗原。洗滌除去未結(jié)合的抗原及雜質(zhì)。
2.加稀釋的受檢血清,保溫反應(yīng)。血清中的特異抗體與固相抗原結(jié)合,形成固相抗原抗體復(fù)合物。經(jīng)洗滌后,固相載體上只留下特異性抗體,血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3.加酶標抗抗體,可用酶標抗人Ig以檢測總抗體,但一般多用酶標抗人IgG檢測IgG抗體。固相免疫復(fù)合物中的抗體與酶標抗體抗體結(jié)合,從而間接地標記上酶。洗滌后,固相載體上的酶量與標本中受檢抗體的量正相關(guān)。
4.elisa酶聯(lián)免疫試劑盒價格加底物顯色本法主要用于對病原體抗體的檢測而進行傳染病的診斷。
優(yōu)點評估:只要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體建立檢測相應(yīng)抗體的方法。間接法成功的關(guān)鍵在于抗原的純度。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結(jié)果,但應(yīng)盡可能予以純化,以提高試驗的特異性。
G1氨基丁酸A型受體相似蛋白2抗體 TBX3
G2期/S期應(yīng)答相關(guān)蛋白1抗體 Tbx21/T-bet
GADD153抗體 TBX2/T-box2
gamma氨基丁酸B型受體1抗體 TBX2/T-box2
gamma連環(huán)蛋白抗體 TBX18
GATA結(jié)合蛋白3抗體 Tau protein
GATA結(jié)合蛋白4抗體 Tau protein
GATA結(jié)合蛋白5抗體 Tat
GATA結(jié)合蛋白6抗體 TAP2/ABCB3
GDNF家族受體α-1抗體 Tap1/ABCB2
GDNF家族受體α-4抗體 TANK
GLP-1單克隆抗體 Tanis/SELS(Selenoprotein S)
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