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為何進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒實驗血清樣本都需要稀釋?
閱讀:168 發(fā)布時間:2017-9-8 每一盒進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒里面都有一份對應(yīng)的說明書,而每一份說明書里都會有寫樣本和稀釋液的稀釋比例,為什么樣本都需要稀釋呢?今天的文章中,現(xiàn)在為您分析:為何ELISA實驗血清樣本都需要稀釋?
在ELISA試劑盒實驗血清為什么要稀釋?有兩個原因:
1)競爭抑制比較明顯,應(yīng)稀釋競爭物;
2)以降低非特異性反應(yīng),使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來。
血清稀釋用普通的PBS即可,可加1%的BSA,能有效降低ELISA本底,當(dāng)然如果你嫌麻煩我覺得用生理鹽水替代PBS關(guān)系也不大。不管你是用直接競爭還是間接競爭,血清的稀釋倍數(shù)肯定要事先確定,但也不用一點(diǎn)點(diǎn),你做一個預(yù)試驗即可,選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù),即你的競爭ELISA中陰性孔OD在1.0,這樣作出來的曲線比較敏感。
ELISA試劑盒實驗稀釋血清的步驟:
先把蛋白稀釋一定的倍數(shù),比如說10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確定一個參數(shù)),將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板,再用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進(jìn)行孵育后洗滌,再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng),經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應(yīng)后分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度。進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 鑒別 氨基己酸
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 含量測定 水楊酸
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 檢查用 α-甲基吡啶
常溫,避光 規(guī)格: 100mg *: 檢查用 甲磺酸酚妥拉明
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 含量測定 鹽酸萘甲唑林
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 檢查用 氨苯砜
常溫,避光 規(guī)格: 100mg *: 含量測定 阿替洛爾
常溫,避光 規(guī)格: 50mg *: 含量測定 倍他米松
常溫,避光 規(guī)格: 100mg *: 含量測定 丙酸倍氯米松
進(jìn)口elisa酶聯(lián)免疫試劑盒