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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司 |
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—— 銷(xiāo)售熱線(xiàn) ——
18321818584 |
| 參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間：2022-04-24 14:43:16瀏覽次數(shù)：250
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-01X1427 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕；
4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
| 大鼠腓腸肌細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1427 |
商品介紹：
名稱(chēng) 大鼠腓腸肌細(xì)胞 2.組織來(lái)源：骨骼肌組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡(jiǎn)介： 大鼠腓腸肌細(xì)胞分離自小腿肌肉組織；腓腸肌位于小腿后面的皮下，是一個(gè)淺表的肌肉，當(dāng)人體站立時(shí)，可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉，有內(nèi)、外二頭，內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起，外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端，在二頭的深面各有一滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大，在腘窩下角彼此鄰近，所成夾角多為25°～30°，此肌下行與比目魚(yú)肌移行為跟腱，止于跟骨結(jié)節(jié)。腓腸肌的動(dòng)脈發(fā)自腘動(dòng)脈、靜脈與動(dòng)脈伴行，注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經(jīng)全部來(lái)自脛神經(jīng)。包括內(nèi)、外側(cè)肌神經(jīng)。腓腸肌在行走及站立時(shí)能提足跟向上，直立時(shí)，腓腸肌和比目魚(yú)肌都參加強(qiáng)固膝關(guān)節(jié)，并調(diào)節(jié)小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕，可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn)。腓腸肌還可影響足的縱弓，該肌癱瘓或時(shí)，足縱弓將加深。該肌由脛神經(jīng)支配，股骨髁上骨折時(shí)，因腓腸肌收縮遠(yuǎn)側(cè)端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉。腓腸肌細(xì)胞屬于骨骼肌細(xì)胞的一種，骨骼肌又稱(chēng)橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長(zhǎng)軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線(xiàn)稱(chēng)H線(xiàn)。H線(xiàn)的中部有一M線(xiàn)。明帶中間，有一條較暗的線(xiàn)稱(chēng)為Z線(xiàn)。兩個(gè)Z線(xiàn)之間的區(qū)段，叫做一個(gè)肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。 5.方法簡(jiǎn)介： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腓腸肌細(xì)胞采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測(cè)： 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腓腸肌細(xì)胞經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號(hào)CM-R326 換液頻率每2-3天換液一次 生長(zhǎng)特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以?xún)?nèi)狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
CDON / CDO 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
MST1R / CD136 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
SELL / CD62L / L-selectin 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CD46 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CD40L / CD154 / TNFSF5 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
PDGFRB / CD140b 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
ROBO4 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
CD59 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 CD16a / FCGR3A 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠 ICAM1 / CD54 細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) (變性)
大鼠腓腸肌細(xì)胞Alishewanella fetalis25羥基3檢測(cè)試劑盒
Alishewanella fetalis3,4二羥基檢測(cè)試劑盒
Alishewanella fetalis4-羥基壬烯檢測(cè)試劑盒
Alishewanella fetalis5羥基乙酸檢測(cè)試劑盒
Alishewanella fetalis5羥色檢測(cè)試劑盒
Alishewanella fetalis5-羥色受體7檢測(cè)試劑盒
Alishewanella fetalis6酮前列腺素F1α檢測(cè)試劑盒
Alishewanella fetalis8羥基脫氧鳥(niǎo)苷檢測(cè)試劑盒
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