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雞小腸黏膜上皮細胞

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更新時間:2022-04-13 08:48:07瀏覽次數:245

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0719 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
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組織樣品陽性染色試劑盒

詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規(guī)格

貨號

雞小腸黏膜上皮細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0719

商品介紹:

名稱    雞小腸黏膜上皮細胞 

2.組織來源:小腸組織

3.產品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

雞小腸黏膜上皮細胞分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內,上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的,因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動的動力,促使食物向下運動。腸黏膜上皮細胞是機體內外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質和強度。

5.方法簡介:

實驗室分離的雞小腸黏膜上皮細胞采用中性蛋白酶-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的雞小腸黏膜上皮細胞Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產品貨號CM-C009

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)上皮細胞樣

傳代特性可傳1

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 USH1C 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

 C5 基因全長ORF克隆

 IL21 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)

 F-Spondin 基因全長ORF克隆

 IL36B / IL1F8 轉錄變體2 基因全長ORF克隆

 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 基因全長ORF克隆

 PTPN2 轉錄變體1 基因全長ORF克隆

 KLB / Klotho beta 基因全長ORF克隆

 TFPI 基因全長ORF克隆

 MEPE 基因全長ORF克隆

雞小腸黏膜上皮細胞6.25-400 pg/mL ELISA Kit for Human Protein unc-13 homolog C

0.625-40 ng/mL 人成纖維細胞生長因子4(FGF-4)ELISA試劑盒

無鹽胰胨水 英文名稱: 產品規(guī)格:20支

胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA) 英文名稱:TSA Agar 產品規(guī)格:250g

0.156-10 ng/mL 人黑色素濃縮激素(PMCH)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人腎臟雄激素調節(jié)蛋白(ARP)ELISA試劑盒

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Melanocortin receptor 4

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Gremlin-2

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human E-selectin

腸道菌富集肉湯培養(yǎng)基(USP) 英文名稱:Enterobacteria Enrichment Broth-Mossel 產品規(guī)格:250g

 


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