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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-06 08:32:20瀏覽次數(shù)：270
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X0101 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| Hep 3B2.1-7 (肝癌細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0101 |
商品介紹：
名稱 Hep 3B2.1-7 (肝癌細胞) 別稱Hep 3B2_1-7; Hep 3B2; HEP-3B2; HEP3B2; Hep-3B; HEP-3B; Hep 3B; Hep3B; HEP3B 種屬人類 年齡（性別）男性，8歲 組織來源肝細胞癌，肝 生長特性貼壁細胞 細胞形態(tài)上皮細胞樣 背景描述Hep 3B2.1-7細胞是來自8歲男性黑人的組織。Hep 3B2.1-7細胞的染色體模式數(shù)目為60，在裸鼠中能致瘤。Hep 3B2.1-7細胞整合了完整的乙型肝炎病毒基因組，需在2級生物安全防護下操作。 生物安全等級2 生長培養(yǎng)基MEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例1:2-1:3 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~40-50小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 致瘤性Yes, in nude mice. 基因表達情況alpha fetoprotein (alpha-fetoprotein); hepatitis B surface antigen (HBsAg); albumin; alpha2 macroglobulin (alpha-2-macroglobulin); alpha1 antitrypsin (alpha-1-antitrypsin); transferrin;, alpha1 antichymotrypsin (alpha-1-antichymotrypsin); haptoglobin; ceruloplasmin; plasminogen; complement (C3, C4); C3 activator; fibrinogen; alpha1 acid glycoprotein (alpha-1 acid glycoprotein);, alpha2 HS glycoprotein (alpha-2-HS-glycoprotein); beta lipoprotein (beta-lipoprotein); retinol binding protein (retinol- |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
核糖核酸(RNASE1/RIB1/RNS1)免疫試劑盒*直銷
B7-H4 免疫試劑盒進口、分裝
丁型肝炎病毒抗體(HDV antibody)免疫試劑盒*直銷
γ干擾素受體(IFN-γR)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
α2巨球蛋白(α2-MG)免疫試劑盒進口、分裝
DNA甲基轉(zhuǎn)移1(DNMT1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
3-葡萄糖苷酸孕二醇(PdG)免疫試劑盒進口、分裝
低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)免疫試劑盒進口、分裝
牛γ氨基丁酸(GABA)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
Hep 3B2.1-7 (肝癌細胞) 2 ug pCDH-EF1-copGFP pCDH-EF1-copGFP 低溫運輸，-20℃保存
HBI微生物生化鑒定條
25次 雙染細胞凋亡檢測試劑盒 Double-Stain Apoptosis Detection Kit 4℃避光保存
500mL IEF Anode Buffer,50X IEF Anode Buffer,50X 常溫保存
50次 即用型多重 PCR試劑盒 Multiplex PCR Marster Mix -20℃保存
2 ug pLVCT-rtTR-KRAB-2SM2 pLVCT-rtTR-KRAB-2SM2 低溫運輸，-20℃保存
類桿菌-膽汁-七葉苷（BBE）瓊脂 BBE Agar 250g
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