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上海谷研實業(yè)有限公司 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2022-04-24 10:16:30瀏覽次數(shù)：300
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| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號 | GOY-01X1381 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 產(chǎn)品僅供科研使用 |
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1381 |
商品介紹：
名稱 小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞 2.組織來源：腦組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞分離自下丘腦；下丘腦又稱丘腦下部，位于大腦腹面、丘腦的下方，是調(diào)節(jié)內(nèi)臟活動和內(nèi)分泌活動的較高級神經(jīng)中樞所在。下丘腦自前向后可分三部﹐即前部（又名視前區(qū)和視上區(qū)）﹑中部（結(jié)節(jié)區(qū)）和后部（乳頭體區(qū)）。下丘腦具有許多細(xì)胞核團(tuán)和纖維束﹐與中樞神經(jīng)系統(tǒng)的其它部位具有密切的相互聯(lián)系。它不僅通過神經(jīng)和血管途徑調(diào)節(jié)腦垂體前﹑后葉激素的分泌和釋放﹐而且還參與調(diào)節(jié)自主神經(jīng)系統(tǒng)﹐如控制水鹽代謝﹑調(diào)節(jié)體溫﹑攝食﹑睡眠﹑生殖、內(nèi)臟活動以及情緒等。下丘腦神經(jīng)元與來自其他部位的神經(jīng)纖維有廣泛的突觸聯(lián)系，可以接受很多神經(jīng)沖動，為內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的中心。它們能調(diào)節(jié)垂體前葉功能，合成神經(jīng)垂體激素及控制自主神經(jīng)和植物神經(jīng)功能。故提取下丘腦神經(jīng)元進(jìn)行體外培養(yǎng)，建立下丘腦神經(jīng)元體外實驗平臺具有重要意義。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞采用胰蛋白酶消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml） 培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M242 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)神經(jīng)元細(xì)胞樣 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
ERP27 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IZUMO4 / C19orf36 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
IFI30 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD1B / CD1A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
SIGLEC5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
類缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 (group M, subtype CRF07_BC) gp140 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
AGER / RAGE 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NRG1-beta 1 (ECD) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ENPP5 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ANGPTL4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞(R)-4-苯基-2-惡唑烷酮 98%2-二苯甲酮 98%Anti-PRL 泌乳素抗體
L-苯氨 98%2-溴苯乙酮 98%Anti-PRL1/PTP4A1 肝再生酯1抗體
L-苯甘氨 98%3-溴代苯乙酮 98%Anti-PRL2/PTP4A2 肝再生酯2抗體
(S)-4-苯基-2-惡唑烷酮 98%2-氯代苯乙酮 98%(劇品)Anti-PRL3/PTP4A3 酯3蛋白抗體
D-苯甘氨 99%2,4-二羥基苯乙酮 99%Anti-prox-1 prox-1抗體
D-脯氨 98%3'-羥基苯乙酮 98%Anti-PH-4/P4H-TM 脯水解4抗體
L-纈氨 97%4-羥基二苯甲酮 98%Anti-PHD3 脯羥化抗體
D-纈氨 98%2,4,6-三羥基苯乙酮 一水合物 98%Anti-PHD2 脯羥化2抗體
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