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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞) | 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0407 |
商品介紹：
名稱 P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞) 別稱P3/NSI/1-AG4-1; P3/NS1/1-Ag4-1; P3/NS1/1-AG4-1; P3/NS1/Ag4-1; P3 NS1 Ag4/1; P3 NS1 Ag4; P3.NS-1/1.Ag4.1; P3-NS1/1-Ag4-1; P3-NS1/1Ag 4.1; P3/NS-1; NS1/1-Ag4.1; NS1-1 Ag4.1; NS-1-Ag4-1; NS1-Ag4/1; NS1-Ag 4/1; NS1-Ag4; P3X63NS1; NS-I/1; NS-1; NS1; GM03573; GM-3573 種屬小鼠 年齡（性別）不詳 組織來源B淋巴細胞；漿細胞；骨髓瘤 生長特性懸浮細胞 細胞形態(tài)淋巴母細胞樣 背景描述P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]是P3X63Ag8細胞的一個不分泌克隆。Kappa鏈合成了但不分泌，能抗0.1mM 8-氮雜鳥嘌呤，但不能在HAT培養(yǎng)基中生長。據(jù)報道，P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞是缺失了3-酮類固醇還原酶活性的膽固醇營養(yǎng)缺陷型細胞。 生物安全等級1 生長培養(yǎng)基DMEM＋10% FBS＋1% P/S 推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL 推薦換液頻率2~3次/周 倍增時間~24小時 凍存條件 凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮 培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5% 溫度：37℃ 抗原表達情況H-2d 基因表達情況immunoglobulin (not secreted), H-2d 注意事項該細胞為懸浮細胞，請注意離心收集細胞懸液；請勿直接倒掉細胞培養(yǎng)液。 |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
LACRT 基因全長ORF克隆
LY6D 基因全長ORF克隆
PVALB 基因全長ORF克隆
DCD 基因全長ORF克隆
TP53AIP1 基因全長ORF克隆
HIST1H4A 基因全長ORF克隆
GAST 基因全長ORF克隆
DEFA6 基因全長ORF克隆
DEFB127 基因全長ORF克隆
FAR2 基因全長ORF克隆
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小鼠骨髓瘤細胞)100µL 小鼠抗mCherry標簽單抗 Anti mCherry-Tag Mouse MAb -20℃保存
2 ug PT/neo PT/neo 低溫運輸，-20℃保存
100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 7.5 常溫
2 ug pDC315 pDC315 低溫運輸，-20℃保存
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 Thiolglycollate Medium 250g
25g 水楊酸 Salicylic Acid 室溫避光保存
50T 豌豆內(nèi)源基因PCR檢測試劑盒 低溫運輸，-20℃保存
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