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HL-60 (原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2022-04-06 08:48:39瀏覽次數(shù):264

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0109 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
HL-60 (原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞) 的相關(guān)*:phospho-Dnmt1(Ser154) 磷酸化DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體 規(guī)格: 0.1ml
β-casein β-酪蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
IL-17C 白介素-17C抗體 規(guī)格: 0.1ml
VTG 魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體 規(guī)格: 0.2ml
C3orf37 3號(hào)染色體開放閱讀框37抗體 規(guī)格: 0.2ml
HLA E 人類

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

HL-60 (原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0109

商品介紹:

名稱    HL-60 (原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞)   

別稱HL 60; HL60

種屬人類

年齡(性別)女性,36

組織來源外周血;早幼粒細(xì)胞;急性粒-單核細(xì)胞白血病

生長特性懸浮細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)原粒細(xì)胞

背景描述HL-60細(xì)胞是一株早幼粒細(xì)胞;HL-60細(xì)胞源自一位患有急性粒-單核細(xì)胞白血病的36歲白人女性。HL-60細(xì)胞自發(fā)分化,丁酸鹽、佛波醇、肉豆蔻酸、DMSO(1%-1.5%)、放素D和視黃酸均可以促進(jìn)分化。HL-60細(xì)胞表現(xiàn)出吞噬活性,并對(duì)趨化刺激有響應(yīng);HL-60細(xì)胞致癌基因myc表達(dá)陽性。

生物安全等級(jí)1

生長培養(yǎng)基IMDM20% FBS1% P/S

推薦傳代比例3×10^5-5×10^5cells/mL

推薦換液頻率2~3/

倍增時(shí)間~28-40小時(shí)

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in nude mice (subcutaneous myeloid tumors). Yes, in semi-solid media.

受體表達(dá)情況complement, expressed; Fc, expressed

基因表達(dá)情況tumor necrosis factor (TNF), also known as tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha, TNF alpha), after stimulation with phorbol myristic acid, myc+

注意事項(xiàng)該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液;請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液。

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

乙胺碘呋酮(AD)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

8-異構(gòu)前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

己糖激(HK)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

類風(fēng)濕因子(RF)抗體(IgA)免疫試劑盒*直銷

犬血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)免疫試劑盒*直銷

腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

兔子環(huán)鳥苷(cGMP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

大鼠骨橋素(OPN)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

山羊胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

HL-60 (原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞) 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂 Simmons Citrate Agar 250g

5g N- 乙酰 -D- 氨基葡萄糖 Acetyl-D-Glucosamine ?20℃保存

250mL TE Buffer,20X,pH7.6 TE Buffer,20X,pH7.6 常溫保存

50mL DEAE交換介質(zhì) DEAE Medium 常溫干燥封袋保存

2 ug pSV-beta-galactosidase pSV-beta-galactosidase 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mL RNase-free 鹽酸胍溶液,8M  常溫

2 ug pCSN44 pCSN44 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

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