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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠骨細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1319 |
商品介紹：
名稱 小鼠骨細(xì)胞 2.組織來源：骨組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠骨細(xì)胞分離自骨組織；骨組織的細(xì)胞成分包括骨原細(xì)胞、成骨細(xì)胞、骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞。只有骨細(xì)胞存在于骨組織內(nèi)，其他三種細(xì)胞均位于骨組織的邊緣。骨細(xì)胞（Osteocyte）是人體骨骼中最主要的細(xì)胞成分。在成年人骨骼中，骨細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)量的90%～95%，大約是成骨細(xì)胞數(shù)量的20倍。骨細(xì)胞生長在骨骼內(nèi)部的骨基質(zhì)中。骨細(xì)胞的細(xì)胞體呈梭形或類圓形，位于基質(zhì)構(gòu)成的骨陷窩內(nèi)。與神經(jīng)細(xì)胞類似，每個骨細(xì)胞具有大量向外延伸的突觸，而這些突觸均位于由骨基質(zhì)構(gòu)成的骨小管結(jié)構(gòu)中。通過這些突觸，骨細(xì)胞能夠與骨表面的細(xì)胞、周圍其它的骨細(xì)胞進(jìn)行“交流"。普遍認(rèn)為，骨細(xì)胞起源于成骨細(xì)胞。在骨形成的終末階段，成骨細(xì)胞將可能有3種不同的歸宿：分化成為骨細(xì)胞、轉(zhuǎn)移至骨表面成為暫不活動的成骨細(xì)胞、進(jìn)入程序死亡過程（凋亡）。骨細(xì)胞為扁橢圓形多突起的細(xì)胞，核亦扁圓、染色深。胞質(zhì)弱嗜堿性。電鏡下，胞質(zhì)內(nèi)有少量溶酶體、線粒體和粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，高爾基復(fù)合體亦不發(fā)達(dá)。骨細(xì)胞夾在相鄰兩層骨板間或分散排列于骨板內(nèi)。相鄰骨細(xì)胞的突起之間有縫隙連接。在骨基質(zhì)中，骨細(xì)胞胞體所占據(jù)的橢圓形小腔，稱為骨陷窩，其突起所在的空間稱骨小管。相鄰的骨陷窩借骨小管彼此通連。骨陷窩和骨小管內(nèi)均含有組織液，骨細(xì)胞從中獲得養(yǎng)分。 5.方法簡介： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨細(xì)胞采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨細(xì)胞經(jīng)骨鈣素免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M217 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形 傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 LAG3 / CD223 / Lymphocyte activation gene 3 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
FAM3C / ILEI 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
ICAM4 / CD242 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
CD3D & CD3E Heterodimer 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL1R1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL6ST / gp130 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 CD80 / B7-1 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IL2RA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 Transferrin Receptor / TFRC / CD71 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠骨細(xì)胞硝酸銅，三水 99.99% metals basis3-乙酸 分析標(biāo)準(zhǔn)品，>99%Anti-Cygb/FITC 熒光素標(biāo)記球蛋白抗體IgG
鉻酸銫 SP3-乙酸 用于植物培養(yǎng)，98%Anti-CYP450/FITC 熒光素標(biāo)記色素P450單氧化抗體IgG
三氧化二鐵 SP3-酸 98%Anti-CYP1A1/FITC 熒光素標(biāo)記色素P450 1A1抗體IgG
氧化釓 SP3-甲 96%Anti-CYP11A1/P450SCC/FITC 熒光素標(biāo)記色素P450 11A1抗體IgG
99.99% metals basis-3-甲 97%Anti-CYP1A2/FITC 熒光素標(biāo)記色素P450 1A2抗體IgG
鐵 SP3-乙 96%Anti-C ret/RET /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠指狀蛋白RET抗體IgG
氧化鑭 SP-2-羧酸 98%Anti-Phospho-Ret (Tyr905) /FITC 熒光素標(biāo)記化指狀蛋白RET抗體IgG
氟化鋰 99.99% metals basis-3-羧酸 98%Anti-Phospho-Ret (Tyr1062)/FITC 熒光素標(biāo)記化指狀蛋白RET抗體IgG
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