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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1361 |
商品介紹：
名稱 小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 2.組織來源：下腔靜脈組織 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 4.細(xì)胞簡介： 小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自下腔靜脈組織；下腔靜脈是體內(nèi)最大的靜脈，收集下肢、盆部和腹部的靜脈血。下腔靜脈由左、右髂總靜脈匯合而成，匯合部位多在第5腰椎水平，少數(shù)平第4腰椎。下腔靜脈位于脊柱的右前方，沿腹主動脈的右側(cè)上行，經(jīng)肝的腔靜脈溝、穿 膈的腔靜脈孔，開口于右心房。下腔靜脈的前面有肝、胰頭、十二指腸水平部、右睪丸動脈及小腸系膜根越過。后面為有膈腳、第1～4腰椎、有腰交感干和腹主動脈的壁支。右側(cè)與 腰大肌、右腎、右腎上腺相鄰，左側(cè)為腹主動脈。下腔靜脈的屬支有髂總靜脈、右睪丸靜脈、腎靜脈、右腎上腺靜脈、肝靜脈、膈下靜脈和腰靜脈，其中大部分 屬支與同名動脈伴行。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質(zhì)量檢測： 實驗室分離的小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M235 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細(xì)胞形態(tài)內(nèi)皮細(xì)胞樣 傳代特性可傳1-2代 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 JAM-A / F11R 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD70 / CD27L / TNFSF7 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 HER4 / ErbB4 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 IL7R / IL7RA 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 IL27 / Interleukin-27 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 Semaphorin 5A / SEMA5A 細(xì)胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠下腔靜脈內(nèi)皮細(xì)胞Corynebacterium ammoniagenes二?；视蜋z測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes繁殖與呼吸綜合征病抗體檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes芳香化檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes芳香烴受體檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes非酯化脂肪酸檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C檢測試劑盒
Corynebacterium ammoniagenes肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D檢測試劑盒
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