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詳細(xì)介紹
猴型逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
猴型逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌 | 50T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品：
猴型逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
One Step Western Kit HRP (Rabbit)/一步法快速WB(HRP)試劑盒(兔)50次2次、10次、50次gersion
H-97(人高轉(zhuǎn)移肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
MCF全細(xì)胞裂解液100μg100μg
Li-7(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Hep-2, 人喉細(xì)胞系
22RV1(人前列腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
CNE1, 人鼻咽細(xì)胞系
小鼠巨噬細(xì)胞英文名稱(chēng)：Ana-1
801-D (人巨細(xì)胞性肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
BDS培養(yǎng)基/BDS Medium擬桿菌的分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
猴型逆轉(zhuǎn)錄病毒PCR檢測(cè)試劑盒品牌RNF123 環(huán)指蛋白123抗體 0.2ml
EphA2/Eph receptor A2 內(nèi)皮細(xì)胞受體蛋白酪氨酸激酶抗體 0.1ml
Mouse Anti-rat IgG/AP 堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG 0.1ml
Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
Phospho-PLK1 (Ser137) 磷酸化絲/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體 0.1ml
MMP-9 基質(zhì)金屬蛋白酶-9抗體 0.1ml
A2BP1/Fox1 共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 0.2ml
C6orf1 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框1抗體 0.2ml
Angiomotin 血管抑素結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Ubiquityl Histone H2A.X (Lys119) 泛素化組蛋白H2AX抗體 0.2ml
CYLD 微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 0.1ml
SCEL SCEL蛋白抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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