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乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

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100管/48樣198元15 盒 可售
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更新時(shí)間:2025-01-10 15:51:52瀏覽次數(shù):529

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100管/48樣
貨號 GOY-SH282 主要用途 僅用于科研
檢測方法 微量法 產(chǎn)品類別 糖酵解系列
品牌 谷研 貨期 現(xiàn)貨
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:解脲脲原體探針法熒光定量PCR試劑盒泌尿道致病性大腸桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒痘苗病毒探針法熒光定量PCR試劑盒耐腸球菌/雙重探針法熒光定量PCR試劑盒水痘RT-帶狀皰疹病毒探針法熒光定量PCR試劑盒天花病毒探針法熒光定量PCR試劑盒狄斯瓦螨探針法熒光定量PCR試劑盒雅氏瓦螨探針法熒光定量PCR試劑盒瓦螨(大蜂螨?。┩ㄓ锰结樂晒舛縋CR試

詳細(xì)介紹

乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn),不做其他科學(xué)實(shí)驗(yàn)外的使用!
商品屬性:
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

貨號

GOY-SH282

檢測方法

微量法

規(guī)格

100管/48樣

產(chǎn)品類別

糖酵解系列

測定意義:

乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法
LDH(EC 1.1.1.27)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是糖酵解途徑的末端酶,催化丙酮酸與乳酸之間的可逆反應(yīng),伴隨著NAD+/NADH之間互變。
測定原理:
LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸,丙酮酸進(jìn)一步與2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙,在堿性溶液中顯棕紅色,顏色深淺與丙酮酸濃度成正比。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、恒溫水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 14uL×1 支,4℃保存;

組織樣本的前處

①總 GAPDH 酶提?。航ㄗh稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時(shí)間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞的前處理先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

測定步驟:
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)預(yù)熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 樣本、5μL 試劑三和 190μL 工作液,混勻,加入最后一個(gè)試劑的同時(shí)開始計(jì)時(shí),記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2,計(jì)算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計(jì)算

a.用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1286×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.572×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

b.用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計(jì)算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計(jì)算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2572×ΔA÷W

(3)按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算

單位的定義:每一萬個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個(gè)酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=5.144×ΔA

V 反總:反應(yīng)體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應(yīng)時(shí)間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù),500 萬。

生化試劑盒的使用注意事項(xiàng):
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

選擇合適的試劑盒:根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮蜋z測對象選擇合適的試劑盒,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。

嚴(yán)格遵循說明書:按照試劑盒的說明書進(jìn)行操作,避免誤用或浪費(fèi)。

注意保存條件:按照試劑盒的保存條件進(jìn)行妥善保存,避免陽光直射、高溫或潮濕等不利因素。

控制實(shí)驗(yàn)條件:在實(shí)驗(yàn)過程中嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件,如溫度、時(shí)間、pH值等,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品:
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

磷脂酶D(PLD)測試盒可見分光光度法

脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒可見分光光度法

脂蛋白酯酶(LPL)測試盒微量法

直鏈淀粉含量測試盒微量法

脂氧合酶 (LOX)測試盒紫外分光光度法

直鏈淀粉含量測試盒可見分光光度法

脂質(zhì)過氧化物(LPO)測試盒微量法

植酸含量測試盒微量法

脂蛋白酯酶(LPL)測試盒可見分光光度法

植酸含量測試盒可見分光光度法

脂肪酶(LPS)測試盒微量法

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脂肪酶(LPS)測試盒可見分光光度法

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脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法

豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白BELISA試劑盒

脂蛋白酯酶(LPL)測試盒微量法

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脂肪酸合成酶(FAS)測試盒紫外分光光度法

Ⅱ型膠原C端肽ELISA試劑盒

脂氧合酶 (LOX)測試盒微量法

Bcl-2相關(guān)X蛋白ELISA試劑盒

訂購流程:
乳酸脫氫酶(LDH)測試盒微量法

1、訂購前,請與銷售員核對產(chǎn)品中文名稱/CAS號/英文名稱等。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實(shí)好下單后即可當(dāng)天發(fā)貨。(庫存信息以當(dāng)日為準(zhǔn))如有特殊要求請?jiān)诎l(fā)貨前與銷售員聯(lián)系。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨、快遞代收尾款、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4、質(zhì)量保證,嚴(yán)格把關(guān),如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認(rèn)后可包換包退,免除客戶后顧之憂。

5、我司提供完善的售后服務(wù),使用過程中如有任何疑問,可提供技術(shù)指導(dǎo)。


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