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詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
猴痘病毒(MPV)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
猴痘病毒(MPV)核酸檢測試劑盒方法 | 48T | PCR檢測試劑盒 |
樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
猴痘病毒(MPV)核酸檢測試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
2-溴-5-甲吡分子式：172.02分子量： C6H6BrN英文名稱：2- -5- methyl pyridineCAS號：3510-66-5
3,4-二氟三氟甲分子式：182.09分子量： C7H3F5英文名稱：3,4- three f two fCAS號：32137-19-2
1,2,4,5-四氯分子式：215.89分子量： C6H2Cl4英文名稱：1,2,4,5- fourCAS號：95-94-3
乙酸鉀分子式：98.14分子量： C2H3KO2； CH3COOK英文名稱：Potassium acetateCAS號：127-08-2
4-炔丙硫代啉-1,1-二氧物分子式：173.23分子量： C7H11NO2S英文名稱：4- propargyl thiomorpholine -1,1- dioxideCAS號：10442-03-2
4,5-二氮芴-9-酮(DAFO)英文名稱：4,5- two -9- (DAFO) n fluorene ketoneCAS號：50890-67-0分子式：182.18分子量： C11H6N2O
丙氟靈英文名稱：Amino acrylicCAS號：29091-21-2分子式：350.29分子量：C13H17F3N4O4
2,7-二溴咔唑分子式：分子量：英文名稱：2,7- dibromo carbazoleCAS號：136630-39-2
剛果紅英文名稱：Congo redCAS號：573-58-0分子式：696.66分子量： C32H22N6Na2O6S2
2--5-三氟甲吡分子式：162.11分子量： C6H5F3N2英文名稱：2- -5- threeCAS號：74784-70-6
兒茶素英文名稱：ErCAS號：154-23-4分子式：290.26806分子量：C15H14O6
猴痘病毒(MPV)核酸檢測試劑盒方法GNLY/NKG5 顆粒溶素抗體 0.1ml
C21orf55/DnaJC28 21號染色體開放閱讀框55抗體 0.2ml
RND3/RHOE Rho家族GTP酶3抗體 0.1ml
ANKRD40 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白40抗體 0.2ml
FANCF 范可尼貧血相關(guān)蛋白F抗體 0.2ml
HDHD2B/LHPP HDHD2B蛋白抗體 0.2ml
lamin A/C 核纖層蛋白A抗體 0.1ml
Phospho-NMDAR2B (Ser1480) 磷酸化谷氨酸受體2B抗體 0.1ml
Rabbit Anti-horse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗馬IgG 0.1ml
Rabbit anti-chicken IgM whole serum 兔抗雞IgM抗血清 1ml
C10orf30/BEND7 10號染色體開放閱讀框30抗體 0.2ml
F-Actin 纖維狀肌動蛋白抗體 0.1ml
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