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詳細(xì)介紹
反應(yīng)五要素:
乙型流感病毒(IBV)核酸檢測(cè)試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
乙型流感病毒(IBV)核酸檢測(cè)試劑盒方法 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
乙型流感病毒(IBV)核酸檢測(cè)試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
性NT英文名稱(chēng)：Acid black NTCAS號(hào)：分子式：分子量：
殘殺威英文名稱(chēng)：SlaughterCAS號(hào)：114-26-1分子式：209.24分子量： C11H15NO3
3-氯-2-氟吡分子式：131.53分子量： C5H3ClFN英文名稱(chēng)：3- chloride -2-CAS號(hào)：1480-64-4
3-溴吡-N-氧物分子式：174分子量： C5H4BrNO英文名稱(chēng)：3- -N- oxideCAS號(hào)：2402-97-3
2-溴-3-氟三氟甲分子式：243分子量： C7H3BrF4英文名稱(chēng)：2- -3- three fCAS號(hào)：104540-42-3
L-谷氨對(duì)硝酰胺英文名稱(chēng)：L- glutamic acidCAS號(hào)：24032-35-7分子式：267.24分子量： C14H20N4O2
2,5-雙(溴甲)-1,4-雙(辛氧)分子式：520.386分子量： C24H40Br2O2英文名稱(chēng)：2,5- bis (Xiu Jiaji) -1,4- bis (Xin Yangji) benzeneCAS號(hào)：147274-72-4
槐果堿英文名稱(chēng)：SophocarpineCAS號(hào)：145572-44-7分子式：246.35分子量：C15H22N2O
3-溴-1-丙英文名稱(chēng)：3- -1-CAS號(hào)：627-18-9分子式：138.99分子量： C3H7BrO
5-氯-3-并-2,1-異噁唑分子式：229.66分子量： C13H8ClNO英文名稱(chēng)：5- -3- and -2,1- chloride phenyl isoxazoleCAS號(hào)：719-64-2
雙(三氟-2,4-戊二酮)錳分子式：361.1分子量： C10H8F6MnO4英文名稱(chēng)：Double (three fluoro -2,4- base manganese pentanedione)CAS號(hào)：20080-72-2
乙型流感病毒(IBV)核酸檢測(cè)試劑盒方法PPM1B 蛋白質(zhì)磷酸酶1B抗體（PP2Cβ） 0.2ml
CCL21/6Ckine 淋巴細(xì)胞趨化因子CCL21抗體 0.1ml
FMRP/FMR1 脆性X智力低下蛋白抗體 0.2ml
phospho-ATF2(Ser322) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 0.1ml
GLP-1(1G9) GLP-1單克隆抗體 0.1ml
5 MethylCytosine 5甲基胞嘧啶抗體 0.2ml
OPGL/RANKL/ODF 骨保護(hù)蛋白配體抗體(破骨細(xì)胞分化因子) 0.1ml
SUPT16H/CDC68 染色體特異性轉(zhuǎn)錄延伸因子抗體 0.2ml
CDK6 周期素依賴(lài)性激酶6抗體 0.1ml
CTRP1/G protein coupled receptor interacting protein 1 G蛋白偶聯(lián)受體相互作用蛋白1抗體（補(bǔ)體Clq TNF相關(guān)蛋白1） 0.2ml
AVEN 細(xì)胞死亡調(diào)節(jié)蛋白抗體(凋亡、半胱胺酸蛋白酶激活抑制劑) 0.1ml
NOL8 核仁蛋白8抗體 0.2ml
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