肺炎鏈球菌（SP）核酸檢測試劑盒方法

樣本采集、存放及運輸：
1、肺炎鏈球菌(SP)核酸檢測試劑盒方法樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:

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使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

反應(yīng)五要素:
肺炎鏈球菌(SP)核酸檢測試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

對氟硝分子式：141.1分子量： C6H4FNO2英文名稱：To fCAS號：350-46-9

溴酚藍英文名稱：Bromine phenol blueCAS號：115-39-9分子式：669.96分子量： C19H10Br4O5S

2-(4-二羥)-4-羧喹啉分子式：293.08分子量： C16H12BNO4英文名稱：2- (4- -4- two hydroxy phenyl quinoline carboxylic borane)CAS號：373384-17-9

六氟分子式：186.05分子量： C6F6英文名稱：Six -CAS號：392-56-3

1-乙-4-[(4-正丙烷)乙炔]分子式：248.36分子量： C19H20英文名稱：1- ethyl -4-[(4- phenyl group) acetylene groupCAS號：102225-55-8

人參皂甙Rg3英文名稱：Ginsenoside Rg3CAS號：14197-60-5分子式：785.01328分子量：C42H72O13

3-溴-2-乙氧吡分子式：202分子量： C7H8BrNO英文名稱：3- bromine -2- ethylCAS號：57883-25-7

1-溴-2,3-二甲氧分子式：217.06分子量： C8H9BrO2英文名稱：1- two -2,3-CAS號：5424-43-1

苦鬼臼毒素英文名稱：PicropodophyllotoxinCAS號：477-47-4分子式：414.41分子量：C22H22O8

N-(2-硝)乙胺英文名稱：N- (2- nitro phenyl) ethyl alcohol amineCAS號：4926-55-0分子式：182.18分子量： C8H10N2O3

六甲分子式：162.27分子量： C12H18英文名稱：Six methyl benzeneCAS號：87-85-4

肺炎鏈球菌(SP)核酸檢測試劑盒方法BPIL1  殺菌通透性增加蛋白樣1抗體 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.1ml

phospho-RUNX2(Ser451)  磷酸化成骨特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體 0.1ml

Phospho-Rictor (Thr1135)  磷酸化雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體 0.1ml

NKG2C  NK細胞受體2C抗體 0.2ml

FEN1  結(jié)構(gòu)特異性核酸酶FEN1抗體 0.2ml

FOXO1 + FOXO3 + FOXO4  叉頭蛋白O1/O3/O4抗體 0.2ml

RNF40  環(huán)指蛋白40抗體 0.2ml

phospho-EGFR (Tyr869)  磷酸化表皮生長因子受體抗體 0.1ml

ANGPTL1/Angiopoietin 1/ANG-1  血管生成素-1抗體 0.1ml

CD59  CD59抗體 0.2ml

Seladin 1/DHCR24  24脫氫膽固醇還原酶抗體 0.2ml