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詳細(xì)介紹
產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測(cè)試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測(cè)試劑盒方法 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測(cè)試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
4-溴-3-氟甲分子式：189.02分子量： C7H6BrF英文名稱：4- -3- fluorideCAS號(hào)：452-74-4
乙酰丙酮鈷（III）分子式：356.26分子量： C15H21CoO6英文名稱：Cobalt (III)CAS號(hào)：21679-46-9
甲氧蟲酰分子式：368.47分子量： C22H28N2O3英文名稱：A methyl oxygenCAS號(hào)：161050-58-4
2-氯-5-硝-4-甲吡分子式：172.57分子量： C6H5ClN2O2英文名稱：2- -5- nitro -4-CAS號(hào)：23056-33-9
2,5-二氯-3-硝吡分子式：192.98分子量： C5H2Cl2N2O2英文名稱：2,5- two -3- nitro pyridineCAS號(hào)：21427-62-3
蒽醌英文名稱：AnthraquinoneCAS號(hào)：84-65-1分子式：208.22分子量： C14H8O2
1,2,4,5-四溴分子式：393.7分子量： C6H2Br4英文名稱：Four - 1,2,4,5-CAS號(hào)：636-28-2
2,3-二-5-羧四唑氯物分子式：302.72分子量： C14H11ClN4O2英文名稱：2,3- two phenyl -5- fourCAS號(hào)：2118-40-3
2,5-二辛-1,4-二-1-丙炔分子式：378.63分子量： C28H42英文名稱：2,5- two -1,4- two -1- octyl propargyl benzeneCAS號(hào)：336625-80-0
環(huán)黃芪英文名稱：Ring of AstragalusCAS號(hào)：84605-18-5分子式：490.71分子量： C30H50O5
酞菁鈷(II)英文名稱：Cobalt phthalocyanine (II)CAS號(hào)：3317-67-7分子式：571.47分子量： C32H16CoN8
產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌(ETEC)核酸檢測(cè)試劑盒方法Ube2B 泛素激活酶2B抗體 0.2ml
Phospho-PSD93 (Tyr340) 磷酸化突觸后密度蛋白93抗體 0.1ml
NIK/MAPKKK14 NFkB誘導(dǎo)激酶抗體 0.1ml
DBF4B/ASKL1 S期激酶活化蛋白DBF4B抗體 0.2ml
PGC1 beta 過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活子1β抗體 0.2ml
Aurora A/ARK-1/AURKA 有絲分裂激酶A抗體 0.1ml
PAI1/PLANH1/Serpine 1 內(nèi)皮細(xì)胞纖溶酶原激活抑制蛋白1抗體 0.2ml
C20orf103 20號(hào)染色體開放閱讀框103抗體 0.2ml
CAMKK2 鈣調(diào)蛋白激酶激酶β抗體 0.1ml
phospho-PIK3R1(Tyr467) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體 0.1ml
phospho-Filamin A/FLNA (Ser2151) 磷酸化細(xì)絲蛋白A抗體 0.1ml
human serum 人血清抗體 0.2ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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