詳細(xì)介紹
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸檢測(cè)試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
三氟乙酰丙酮酸鋁(III)分子式:486.22分子量: C15H12AlF9O6英文名稱:Three acetyl pyruvate (III)CAS號(hào):14354-59-7
水溶胺蘭英文名稱:Water soluble aniline blueCAS號(hào):分子式:分子量:
4-(1-溴代乙)-5-氟-6-氯嘧分子式:239.47分子量: C6H5BrClFN2英文名稱:4- (1-) -5- -6-CAS號(hào):188416-28-6
407有機(jī)載體英文名稱:407 organic carrierCAS號(hào):分子式:分子量:
卡比唑分子式:186.23分子量: C7H10N2O2S英文名稱:卡比唑CAS號(hào):22232-54-8
二羥乙酸鋁分子式:135.05分子量: C2H6AlNO4英文名稱:Two hydroxy amino acidCAS號(hào):13682-92-3
聚二甲硅烷擔(dān)載的鈀/氧鋁混合催英文名稱:Mixed catalysis of palladium / alumina supported by poly two methyl silaneCAS號(hào):P2280分子式:分子量:
甲橙皮甙英文名稱:MethylhesperidinCAS號(hào):11013-97-1分子式:624.59分子量:C29H36O15
錳酸鉀分子式:197.13分子量: K2MnO4英文名稱:Potassium manganateCAS號(hào):10294-64-1
無(wú)花果蛋白酶英文名稱:Fig proteaseCAS號(hào):819分子式:分子量:
氟蟲(chóng)腈砜分子式:453.15分子量: C12H4Cl2F6N4O2S英文名稱:Fluoride, aCAS號(hào):120068-36-2
馬鈴薯特定基因序列(PATA)核酸檢測(cè)試劑盒圖片Mouse Anti-human IgG/FITC FITC標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.3ml
phospho-RPH3AL(Ser234) 磷酸化Ras相關(guān)GTP結(jié)合蛋白抗體 0.1ml
PP2A beta/PPP2CB 蛋白質(zhì)磷酸酶2B抗體 PP2A β PP2A-β 0.1ml
fowl typhoid and pullorum disease 雞白痢、雞傷寒抗體 0.2ml
DLL4/Delta 4 Notch信號(hào)通路Delta樣配體4抗體 0.1ml
RNF149 環(huán)指蛋白149抗體 0.2ml
Mouse Anti-human IgG/Bio 生物素標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
MAP2/MAP-2a.b.c 微管相關(guān)蛋白2抗體 0.1ml
PLK1 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Plk1抗體 0.1ml
MMP-7 基質(zhì)金屬蛋白酶-7抗體 0.1ml
CUEDC2/CUE domain containing 2 CUE結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 0.2ml
HDLBP/vigilin 高密度脂蛋白結(jié)合蛋白抗體 0.2ml