詳細(xì)介紹
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
口蹄疫病毒A亞型(FMDV-A)核酸檢測(cè)試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
(R)-(-)-NBD-Py-NCS分子式:291.29分子量: C11H9N5O3S英文名稱(chēng):(R) - (-) -NBD-Py-NCSCAS號(hào):163927-29-5
擬人參皂苷F11英文名稱(chēng):Human F11CAS號(hào):69884-00-0分子式:801.01分子量: C42H72O14
五氯吡分子式:251.31分子量: C5Cl5N英文名稱(chēng):Five ClCAS號(hào):2176-62-7
1-(二甲乙甲硅烷)咪唑分子式:154.29分子量: C7H14N2Si英文名稱(chēng):1- (two methyl ethyl methyl group)CAS號(hào):62365-34-8
1,5-二羥萘分子式:160.17分子量: C10H8O2英文名稱(chēng):1,5- two hydroxy naphthaleneCAS號(hào):83-56-7
2,6-二異丙萘分子式:212.34分子量: C16H20英文名稱(chēng):2,6- two ISOCAS號(hào):24157-81-1
3-羥-2-甲-4-吡甲醛分子式:137.14分子量: C7H7NO2英文名稱(chēng):3- hydroxy -2- methyl -4- pyridine formaldehydeCAS號(hào):518306-10-0
2,3-雙(羥甲)萘分子式:188.22分子量: C12H12O2英文名稱(chēng):2,3- bis (Qiang Jiaji) naphthaleneCAS號(hào):31554-15-1
二甲分子式:106.17分子量: C6H4(CH3)2英文名稱(chēng):XyleneCAS號(hào):1330-20-7
2,7-二羥萘英文名稱(chēng):2,7- two hydroxy naphthaleneCAS號(hào):582-17-2分子式:160.17分子量: C10H8O2
顏料橙13英文名稱(chēng):Pigment orange 13CAS號(hào):3520-72-7分子式:623.49分子量: C32H24Cl2N8O2
口蹄疫病毒A亞型(FMDV-A)核酸檢測(cè)試劑盒圖片SRRM4 絲氨酸/氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白4抗體 0.2ml
Cdc6 細(xì)胞分裂周期蛋白6抗體 0.1ml
phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體 0.1ml
CK19/CK17/CK14/CK10/CK42 細(xì)胞角蛋白19,17,14,42,10抗體 0.1ml
PLK4/STK18 絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶18 0.2ml
S-100/S100A1 S100A1抗體 0.1ml
phospho-CDKN1B/P27kip1 (Ser178) 磷酸化P27抗體/周期素依賴(lài)激酶抑制劑抗體 0.1ml
LAT/LAT1 T細(xì)胞活化連接蛋白抗體 0.1ml
CD57/HNK1 髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體 0.1ml
phospho-TRIM25(Ser100) 磷酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體 0.1ml
BMP8 骨形態(tài)發(fā)生蛋白8抗體 0.1ml
TCERG1/CA150 轉(zhuǎn)錄延伸調(diào)節(jié)蛋白1抗體 0.1ml