傳染性胃腸炎病毒（PTGV）核酸檢測試劑盒方法

傳染性胃腸炎病毒（PTGV）核酸檢測試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:

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使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
傳染性胃腸炎病毒(PTGV)核酸檢測試劑盒方法	48T	PCR檢測試劑盒

自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

生根粉英文名稱：Rooting powderCAS號(hào)：9873982分子式：分子量：

1-芐-4-分子式：190.28分子量： C12H18N2英文名稱：1- benzyl -4- piperidineCAS號(hào)：50541-93-0

(S)-3-甲酸甲酯鹽酸鹽分子式：165.61798分子量： C6H12ClNO2英文名稱：(S) -3- methyl piperidine hydrochlorideCAS號(hào)：

3,6-二咔唑分子式：197.24分子量： C12H11N3英文名稱：Two 3,6- aminocarbazoleCAS號(hào)：86-71-5

滅幼脲英文名稱：Juvenile ureaCAS號(hào)：57160-47-1分子式：309.151分子量： C14H10Cl2N2O2

葒草苷英文名稱：OrientosideCAS號(hào)：28608-75-5分子式：464.376分子量：C21H20O12

4-(2-乙)吡分子式：122.17分子量： C7H10N2英文名稱：4- (2- amino ethyl) pyridineCAS號(hào)：13258-63-4

間二氯分子式：147分子量： C6H4Cl2英文名稱：Two - PCAS號(hào)：541-73-1

2,5-二氟溴分子式：192.99分子量： C6H3BrF2英文名稱：2,5- two fluorine bromineCAS號(hào)：399-94-0

3-羥-6-甲吡分子式：109.13分子量： C6H7NO英文名稱：3- hydroxy -6- methyl pyridineCAS號(hào)：1121-78-4

丙倍氯米松英文名稱：BeconaseCAS號(hào)：1327543分子式：669.2分子量： C34H49ClO11

傳染性胃腸炎病毒(PTGV)核酸檢測試劑盒方法Rad17/RFC  細(xì)胞周期檢控Rad17蛋白抗體（復(fù)制因子C） 0.1ml

Phospho-NPM (Ser4)  磷酸化核仁磷酸蛋白抗體 0.1ml

ILT2/CD85j  細(xì)胞表面免疫球蛋白樣轉(zhuǎn)錄因子2抗體 0.2ml

PLC β1/Phospholipase C beta 1  磷酯酶Cβ1抗體 0.2ml

CREPT  腫瘤高表達(dá)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白抗體 0.2ml

PHAP1  蛋酸酶2A抑制劑1抗體 0.2ml

Secretin  分泌素抗體 0.1ml

phospho-FAK(Tyr925)  磷酸化粘著斑激酶抗體 0.1ml

RAB6B  RAS癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AB6B抗體 0.1ml

Phospho-mTOR (Thr2446)   磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 0.1ml

IL-4  白介素4抗體 0.1ml

Phospho-FoxO3a (Ser294)  磷酸化叉頭蛋白3A抗體 0.1ml