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詳細(xì)介紹
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測(cè)試劑盒方法使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測(cè)試劑盒方法 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A） 毫升
染色液（t B） 微升
稀釋液（C） 毫升
溶解液（tD） 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
二甲亞砜-13C2分子式：80.15分子量： C2H6OS英文名稱：Two methyl -13C2CAS號(hào)：136321-15-8
4-(二氟溴甲)溴分子式：分子量：英文名稱：4- (Xiu Jiaji - two f)CAS號(hào)：2358-32-9
7-氯-4-羥-2-甲喹啉分子式：193.63分子量： C10H8ClNO英文名稱：7- -4- hydroxy -2- methyl groupCAS號(hào)：15644-88-9
4-溴-3-硝三氟甲分子式：270分子量： C7H3BrF3NO2英文名稱：4- -3- nitro threeCAS號(hào)：349-03-1
4,5-二氟酞腈分子式：164.11分子量： C8H2F2N2英文名稱：4,5- two fluorine phthalocyanineCAS號(hào)：134450-56-9
并四咪唑分子式：252.34分子量： C15H12N2S英文名稱：并四咪唑CAS號(hào)：885051-07-0
1-氯甲萘分子式：176.64分子量： C11H9Cl英文名稱：1- methyl naphthaleneCAS號(hào)：86-52-2
重酸氫鉀分子式：389.91分子量： KHI2O6英文名稱：Potassium hydrogen carbonateCAS號(hào)：13455-24-8
溴代十六烷吡分子式：384.44分子量： C21H38BrN英文名稱：Bromine sixteen alkyl pyridineCAS號(hào)：140-72-7
4,4'-二乙炔聯(lián)分子式：202.26分子量： C16H10英文名稱：4,4'- two acetylene baseCAS號(hào)：38215-38-2
3--5-甲吡分子式：118.14分子量： C7H6N2英文名稱：3- cyano -5- methyl pyridineCAS號(hào)：42885-14-3
豬戊型肝炎病毒(HEV)核酸檢測(cè)試劑盒方法SPHK1 鞘氨醇激酶1抗體 0.2ml
phospho-RPS6KA1(Ser363) 磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體 0.1ml
Metronidazole(1C2) 甲硝唑單克隆抗體 0.2ml
GADD45 gamma 生長(zhǎng)抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γ 0.2ml
phospho-GNA12(Ser68) 磷酸化鳥(niǎo)苷酸調(diào)節(jié)蛋白12抗體 0.1ml
TRAP/Tartrate Resistant Acid Phosphatase 端粒酶調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白抗體 0.1ml
C15orf52 15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框52抗體 0.2ml
C3a Receptor/C3aR 過(guò)敏毒素C3受體/補(bǔ)體C3受體抗體 0.2ml
S100A6BP/CACYBP 鈣周期素結(jié)合蛋白抗體 0.2ml
Phospho-Zap-70(Tyr493) 磷酸化zeta相關(guān)蛋白70抗體 0.1ml
Layilin 透明質(zhì)酸受體抗體 0.1ml
HSP47 熱休克蛋白-47抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
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