牛白血病病毒（BLV）核酸檢測(cè)試劑盒方法

牛白血病病毒（BLV）核酸檢測(cè)試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

反應(yīng)五要素:
牛白血病病毒(BLV)核酸檢測(cè)試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
牛白血病病毒(BLV)核酸檢測(cè)試劑盒方法	48T	PCR檢測(cè)試劑盒

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
牛白血病病毒(BLV)核酸檢測(cè)試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書                                   1份

穿心蓮內(nèi)酯英文名稱：AndrographolideCAS號(hào)：5508-58-7分子式：350.4492分子量：C20H30O5

2-甲酰咪唑分子式：96.09分子量： C4H4N2O英文名稱：2- aCAS號(hào)：10111-08-7

2,6-二溴-4-吡甲醛分子式：264.9分子量： C6H3Br2NO英文名稱：2,6- dibromo -4- pyridine formaldehydeCAS號(hào)：316800-46-1

性藍(lán)41英文名稱：Acid blue 41CAS號(hào)：2666-17-3分子式：487.46分子量： C23H18N3NaO6S

川芎嗪英文名稱：LigustrazineCAS號(hào)：1124-11-4分子式：136.19分子量：C8H12N2

(S,S)-2,2'-異亞丙雙(4--2-惡唑啉)分子式：334.42分子量： C21H22N2O2英文名稱：(S, S) -2,2'- isopropylidenebis (4- phenyl -2- oxazolinyl)CAS號(hào)：131457-46-0

十四烷氯吡分子式：311.93分子量： C19H34ClN英文名稱：Fourteen alkyl chlorideCAS號(hào)：2785-54-8

氯滴滴涕英文名稱：DDT chlorideCAS號(hào)：3563-45-9分子式：388.9379分子量：C14H8Cl6

乙聯(lián)分子式：182.26096分子量： C14H14英文名稱：Ethyl groupCAS號(hào)：40529-66-6

4-羥-4'-硝聯(lián)分子式：215.21分子量： C12H9NO3英文名稱：4- hydroxy -4'- nitro groupCAS號(hào)：3916-44-7

性紫17英文名稱：Acid violet 17CAS號(hào)：4129-84-4分子式：761.92分子量： C41H44N3NaO6S2

RARRES1/TIG1  視黃酸受體應(yīng)答蛋白1抗體 0.1ml

GHDC  GHDC蛋白抗體 0.2ml

phospho-c-Jun(Tyr170)  磷酸化原癌基因c-Jun抗體 0.1ml

NS5ATP9/KIAA0101  丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白5A反式激活蛋白9抗體 0.2ml

phospho-Bid(Ser61)  磷酸化BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白抗體 0.1ml

phospho-HRH1(Ser398)  磷酸化組胺受體H1抗體 0.1ml

AFAP/AFAP-110  微絲相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml

Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml

phospho-Tau protein(Thr212)  磷酸化微管相關(guān)蛋白抗體 0.1ml

PEG10  肝癌高表達(dá)基因抗體 0.1ml

MMP-1  基質(zhì)金屬蛋白酶-1抗體 0.1ml

RPL11/GIG34  細(xì)胞生長(zhǎng)抑制蛋白34 0.2ml