詳細(xì)介紹
腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒圖片使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 分類 |
腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒圖片 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
?
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
2,6-氯-3-吡分子式:273.89分子量: C2H2Cl2IN英文名稱:2,6- chloride -3-CAS號(hào):xv12
(鈀試劑)4-(8-羥-5-喹啉偶氮)萘磺英文名稱:(palladium reagent) 4- (8- hydroxy -5-) naphthalene sulfonic acidCAS號(hào):26644-96-2分子式:379.39分子量: C19H13N3O4S
5-氯-2-硝三氟甲分子式:225.55分子量: C7H3ClF3NO2英文名稱:5- -2- nitro threeCAS號(hào):118-83-2
2,5-二氯吡分子式:147.99分子量: C5H3Cl2N英文名稱:2,5- twoCAS號(hào):16110-09-1
酞菁藍(lán)B英文名稱:Phthalocyanine blue BCAS號(hào):147-14-8分子式:576.08分子量: C32H16CuN8
1,3,5-三(三氟甲)分子式:282.11分子量: C9H3F9英文名稱:1,3,5- three (three f) benzeneCAS號(hào):729-81-7
2,6-二氟甲分子式:128.12分子量: C7H6F2英文名稱:2,6- two fCAS號(hào):443-84-5
派派分子式:149.131分子量: C10N2H英文名稱:Group of radicalsCAS號(hào):4897-50-1
柚皮素英文名稱:NaringeninCAS號(hào):480-41-1分子式:272.25278分子量:C15H12O5
3,4-二氯硝分子式:192分子量: C6H3Cl2NO2英文名稱:3,4- twoCAS號(hào):99-54-7
4-聯(lián)氧磷二酯英文名稱:4- two phenyl phosphate esterCAS號(hào):17269-99-7分子式:402.38分子量: C24H19O4P
腸道病毒EV71核酸檢測(cè)試劑盒圖片MYLIP/Idol 低密度脂蛋白受體的誘導(dǎo)降解蛋白抗體 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml
Mouse Anti-rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml
TIMP-1(NT) 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端) 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.1ml
phospho-BAD(Ser75) 磷酸化相關(guān)死亡促進(jìn)因子抗體 0.1ml
CENPB 著絲粒蛋白B抗體 0.2ml
phospho-APP/ABPP (Ser730) 磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體 0.1ml
Complement C3 beta chain 補(bǔ)體C3b抗體 0.1ml
BAGE4 腫瘤/抗原2.4抗體 0.2ml
Goat Anti-rat IgG/Bio 生物素標(biāo)記的羊抗大鼠IgG 0.1ml
Synaptopodin 突觸極蛋白synaptopodin抗體 0.1ml
反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。