NADH氧化酶(NOX)測(cè)試盒微量法

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正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

商品屬性：

測(cè)定意義：

NOX(EC 1.6.99.3)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可在氧氣存在下,直接將 NADH 氧化為 NAD。該酶不僅參而且與免疫反應(yīng)密切相關(guān)。 

測(cè)定原理:

 NOX 能夠?qū)?NADH 氧化為 NAD,NADH 的氧化與 2,6 二氯酚靛藍(lán)(DCPIP)的還原相偶聯(lián),藍(lán)色的 DCPIP被還原為無(wú)色的 DC測(cè)定藍(lán)色 DCPIP 的還原速率計(jì)算出 NADH 氧化酶活性的大小。 

需自備的儀器和用品: 

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰、蒸餾水 

試劑的組成和配制：

試劑一:液體 100mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑三:液體 1.5mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑四:液體 25mL×1 瓶,4℃保存。

試劑五:粉劑×1 瓶,-20℃保存;臨用前加入 5mL 蒸餾水,用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復(fù)凍融。 

組織樣本的前處理：

組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:

① 準(zhǔn)確稱取 0.1g 組織或收集 500 萬(wàn)細(xì)胞,加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

② 將勻漿 600g,4℃離心 5min。

③ 棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11100g,4℃離心 10min。

④ 上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測(cè)定從線粒體泄漏的 NOX(此步可選做)。

⑤ 步驟④中的沉淀即為線粒體,加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率 20%或200W,超聲 3s,間隔 10 秒,重復(fù) 30 次),用于 NOX 活性測(cè)定。

血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。

測(cè)定步驟：

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 600nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測(cè)定

(1)試劑四于 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)孵育 5min。

(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、200μL 試劑四和 40μL 試劑五,混勻,記錄 600nm處 20s 時(shí)吸光值 A1 和光值 A2,計(jì)算 ΔA=A1-A2。

1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 600nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測(cè)定

(1)試劑四于 37℃(哺乳動(dòng)物)或 25℃(其它物種)孵育 5min。

(2)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、200μL 試劑四和 40μL 試劑五,混勻,記錄 600nm處 20s 時(shí)吸光值 A1 和光值 A2,計(jì)算 ΔA=A1-A2。

生化檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)操作說(shuō)明：

一、抗氧化系列生化檢測(cè)試劑盒

包括氧化酶（XO）活性分析、超氧陰離子清除能力分析、葡萄糖氧化酶活性（GOD）檢測(cè)、總抗氧化能力（TAC）檢測(cè)、植物原花青素(OPC)含量檢測(cè)、植物類黃酮含量檢測(cè)、植物總酚（TP）含量檢測(cè)試劑盒。

氧化酶（XO）活性分析試劑盒為例，提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色分析法，用于測(cè)定各種樣品中的XO活性，特點(diǎn)是測(cè)定血清，血漿，組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的氧化酶活性，以及廣泛的檢測(cè)范圍：15.6 -500 mU/mL。

二、氧化系列生化檢測(cè)試劑盒

包括過(guò)氧化氫酶 (CAT) 活性分析、過(guò)氧化氫（H2O2）檢測(cè)、脂質(zhì)過(guò)氧化(丙二醛) 分析、蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)、超氧陰離子含量檢測(cè)等試劑盒。

蛋白質(zhì)羰基含量檢測(cè)試劑盒（比色法）為例，提供了一種簡(jiǎn)單易用的比色法，用于分析不同生物樣品（細(xì)胞/組織裂解液，生物液體）中蛋白質(zhì)羰基含量。在370 nm處有特征吸收峰。

特點(diǎn)是：1.測(cè)定組織樣本、細(xì)胞、細(xì)菌、血清等中的蛋白質(zhì)羰基含量。2.樣本處理、實(shí)驗(yàn)步驟以及結(jié)果計(jì)算更加詳盡準(zhǔn)確精煉。3.保質(zhì)期長(zhǎng)。

 

 

三、抗逆系列生化檢測(cè)試劑盒

包括超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè)、羥自由基清除能力分析、多酚氧化酶（PPO）活性檢測(cè)、過(guò)氧化物酶(POD)活性檢測(cè)等試劑盒。

超氧化物歧化酶 (SOD) 活力檢測(cè)試劑盒為例，提供一種簡(jiǎn)單易用的比色測(cè)定法，用于定量測(cè)定血清，血漿，組織/細(xì)胞裂解液和其它生物體液中的SOD酶活性。

特點(diǎn)是：1.測(cè)定血清，血漿，組織/細(xì)胞裂解物和其他生物體液中的SOD酶活性。2.通過(guò)WST-8法測(cè)定SOD活性，zui大抑制率可接近100％，不受一些常見干擾因素的干擾。3.廣泛的檢測(cè)范圍：3.13- 200U/mL。

公司正在出售的產(chǎn)品：