當(dāng)前位置:北京百奧創(chuàng)新科技有限公司>>EZBioscience>> EZB-miRT2-plus-SEZBioscience microRNA升級版試劑盒
一、試劑盒簡介
使用通過大腸桿菌Poly(A)聚合酶將polyA尾添加到miRNA的3'末端的方法來合成miRNA的第一鏈cDNA。該試劑盒中包含一個正向U6引物和一個通用qPCR反向引物(Universal3'qPCR引物),可用于定量檢測所有 miRNA,因此,aPCR反應(yīng)僅需要每個靶標(biāo)miRNA的特異性正向引物。該試劑盒包括兩個步驟;首先,用
gDNA去除劑外理RNA以消除基因組DNA。然后,在poly(A)拖尾反應(yīng)中,將polv(A)尾添加到miRNA分子的3'-末端。使用專門設(shè)計的Universal RTPrimer進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)以生成miRNA的第一條鏈。
EZBioscience microRNA升級版試劑盒(?。?/strong>是一種快速逆轉(zhuǎn)錄試劑盒,其中包含用于去除基因組DNA的高效DNase。它包含四管試劑:gDNA去除劑,miRNART酶混合物,4xmiRNART緩沖液和Universal3gPCR引物。
其中,gDNA去除劑主要包括濃縮的DNase和緩沖液。它僅需在室溫(19~27℃)下反應(yīng)5分鐘,即可降解超過95%的殘留基因組DNA,從而大大減少了對結(jié)果的干擾。
miRNART酶混合物主要包含大腸桿菌Poly(A)聚合酶,逆轉(zhuǎn)錄酶和RNase抑制劑。大腸桿菌Poly(A)聚合酶不僅具有添加polvy(A)尾部的高效率,而且可以特異性識別單鏈miRNA,從而避免了具有雙鏈結(jié)構(gòu)的
miRNA前休的進一步逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)·突變休M-MIV逆轉(zhuǎn)錄酶具有很強的抗手擾能力和擴增能力,并目擴增交
率特別好。
4x miRNA RT Buffer包含用于miRNA聚腺苷酸化和逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的所有原材料和引物,包括Oligo(dT)-通用標(biāo)簽引物,緩沖液和dNTPs,并且經(jīng)過仔細優(yōu)化,以確保同時進行聚腺苷酸化和逆轉(zhuǎn)錄。
二、產(chǎn)品組分
三、保存條件 -20℃保存
四、EZBioscience microRNA升級版試劑盒(?。?/strong>特點
加尾法一步快速高效率將所有miRNA逆轉(zhuǎn)錄為可直接檢測的cDNA。無需設(shè)計miRNA特異性引物,僅需30分鐘即可完成microRNA的逆轉(zhuǎn)錄,簡單高效率。含有通用的反向qPCR引物,可使用常規(guī)qPCR試劑。