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技術(shù)文章

小鼠elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)效果定性判別測定

閱讀:603          發(fā)布時(shí)間:2018-11-20

      小鼠elisa試劑盒分別用"陽性"、"陰性"標(biāo)明。"陽性"標(biāo)明該標(biāo)本在該測定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判別法也可得到半定量效果,即用滴度來標(biāo)明反應(yīng)的強(qiáng)度,其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性實(shí)驗(yàn)。
 

a.陽性判定值
陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個(gè)特定的常數(shù),以此作為判別效果陽性或陰性的標(biāo)準(zhǔn)。


陽性判定值=NCX+0.05
標(biāo)本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應(yīng)留心的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。


根據(jù)以上敘說可以看出,ELISA試劑盒在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到實(shí)驗(yàn)的質(zhì)控效果,試劑蛻變和操作不當(dāng)均會發(fā)作"實(shí)驗(yàn)無效"的結(jié)果。


.標(biāo)本/陰性對照比值


 在實(shí)驗(yàn)條件(包括試劑)較難保證安穩(wěn)的情況下,這種判別法較為適宜。在得出標(biāo)本(S)和陰對  照(N)的A值后,核算S/N值。也有寫作P/N的,這兒的P不代表陽性(positive),而是患者(patient)的縮寫,不應(yīng)誤解。為防止混雜,更宜用S/N標(biāo)明。在前期的間接法ELISA中,有些作  者定出S/N為陽性標(biāo)準(zhǔn),現(xiàn)多為各種測定所沿用。實(shí)際上每一測定系統(tǒng)應(yīng)該用實(shí)驗(yàn)求出各自的S/N  的閾值。更應(yīng)留心的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質(zhì)的人血清。

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