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基因捕獲法的優(yōu)缺點(diǎn)

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用常規(guī)方法進(jìn)行基因敲除研究需耗費(fèi)大量的時(shí)間和人力,研究者必須針對(duì)靶位點(diǎn)在染色體組文庫(kù)中篩選相關(guān)的染色體組克隆,繪制相應(yīng)的物理圖譜,構(gòu)建特異性的基因敲除載體以及篩選中靶ES 細(xì)胞等,通常一個(gè)基因剔除純合子小鼠的獲得需要一年或更長(zhǎng)的時(shí)間。面對(duì)人類基因組計(jì)劃產(chǎn)生出來的巨大的功能未知的遺傳信息,傳統(tǒng)的基因敲除方法顯得有些力不從心。因此,基因捕獲法應(yīng)運(yùn)而生,利用基因捕獲可以建立一個(gè)攜帶隨機(jī)插入突變的ES 細(xì)胞庫(kù),節(jié)省大量篩選染色體組文庫(kù)以及構(gòu)建特異打靶載體的工作及費(fèi)用,更有效和更迅速地進(jìn)行小鼠染色體組的功能分析。
 
此方法的缺點(diǎn)是只能剔除在Es 細(xì)胞中表達(dá)的基因.單種的細(xì)胞類型中表達(dá)的基因數(shù)目約為I04,現(xiàn)在的基因捕獲載體從理論上來講應(yīng)能剔除所有在ES細(xì)胞表達(dá)的基因,因此,在ES 細(xì)胞中進(jìn)行基因捕獲還是大有可為的。用基因捕獲法進(jìn)行基因剔除的另一個(gè)缺點(diǎn)是無法對(duì)基因進(jìn)行精細(xì)的遺傳修飾。

C [ATCC 25312, CIP 104337, NCIB 12416]    Escherichia coli (Migula) Caslani and Ch ..
NRRL YB-3239 [CBS 5762, CCRC 20470, FMJ 7135 ..    Barnettozyma californica (Lodder) Kurtzman ..
CAL/CSF1 [CBS 6832, NRRL Y-12936, NRRL Y-829 ..    Sporidiobolus salmonicolor Fell et Tallman
XM101    Dictyosium discoideum Raper
yD2461    Homo sapiens, human
    Patulibacter americanus Reddy and Garcia-Pi ..
FAS21    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..
RP24238D19    Mus musculus, mouse
YJL065C BY4743, homozygous diploid [31359]    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..
    dried
4AB-65    Varicosporium elodeae Kegel
110S    Ardenscatena maritimus
YGL218W BY4742, mating type alpha [16884]    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..
FRI 182    Poria rhizomorpha Bagchee, eomorph
int-2i    Mus musculus, mouse
YPL227C BY4743, homozygous diploid [31065]    Saccharomyces cerevisiae Meyen ex E.C. Hans ..

 

 

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