公司動(dòng)態(tài)
轉(zhuǎn)化細(xì)胞的來源及解決方式
閱讀:236 發(fā)布時(shí)間:2017-9-20由于體外培養(yǎng)的轉(zhuǎn)化細(xì)胞自身沒有抵抗污染的能力,而在培養(yǎng)基中加抗生素的抗污染能力也是有限的,因而細(xì)胞微生物污染一旦發(fā)生往往是無法挽救的。一般在細(xì)胞受到污染早期或污染較輕時(shí),能及時(shí)處理并除去污染物,部分細(xì)胞還有可能得到挽救。但當(dāng)細(xì)胞持續(xù)在污染環(huán)境中生長(zhǎng)時(shí),輕者細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,分裂相減少,細(xì)胞變得粗糙,輪廓增強(qiáng),胞漿中出現(xiàn)較多的顆粒物質(zhì);較重的細(xì)胞增殖停止,分裂相消失,細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)大量堆積物,細(xì)胞變圓或崩解,從瓶壁脫落。
不同的微生物污染物對(duì)細(xì)胞的影響也有差別,微生物中支原體和病毒對(duì)細(xì)胞形態(tài)和技能的影響是長(zhǎng)期的,緩慢的和潛在的。而霉菌和細(xì)菌增殖迅速,能在很短的時(shí)間內(nèi)抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或產(chǎn)生有毒物質(zhì)殺滅細(xì)胞。
霉菌污染
表現(xiàn):真菌的種類很多,污染的多是曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物,一般肉眼可見,較易被發(fā)現(xiàn),短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁。倒置顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間有縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀,樹枝狀或管狀菌絲,并漂浮在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長(zhǎng)。有時(shí)通過顯微鏡可能會(huì)發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)瓶外壁生長(zhǎng)的菌絲,較易誤認(rèn)為污染。發(fā)現(xiàn)瓶外的菌絲后應(yīng)及時(shí)用酒精擦拭干凈。
處理:首先,轉(zhuǎn)化細(xì)胞需確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體,還是酵母?,F(xiàn)在你確認(rèn)是霉菌污染。因此,盡快把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,同時(shí)需要對(duì)實(shí)驗(yàn)過程中所用的器材和試劑做處理。
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞