p53amyloid formation抑制劑(ReACp53)

p53amyloid formation抑制劑(ReACp53)公司正在出售的產(chǎn)品：P16/FITC 熒光標(biāo)記兔抗抑癌因p16抗體IgG過氧化環(huán)己酮 50%鄰苯二二辛酯溶液
P19ARF/FITC 熒光標(biāo)記p19ARF抑癌因抗體IgG石炭品紅 AR
P21/WAF1/CIP1 /FITC 熒光標(biāo)記p21抗體IgG鉻銫 99.9% metals basis
P27/kip1 /FITC 熒

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

少根根霉人表面膜免疫球蛋白MBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠T活化連接蛋白(LAT)

大腸埃希菌人表面膜免疫球蛋白DBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)

地衣芽孢桿菌人殺傷免疫球蛋白樣受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗內(nèi)膜抗體(EMAb)

假單胞菌屬人殺傷凝集樣受體Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)

昆明漢納酵母人活化蛋白CBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)

小青霉人蛋白CBacillus subtilis subsp. subtilis小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)

香菇屬人血小板因子3Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠解脲脲原體抗體(UU-Ab)

芽孢桿菌屬人凝血原片段F1+2Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)

大腸埃希菌人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP)

蠟狀芽孢桿菌人膜攻擊復(fù)合物Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗中性粒核周抗體(pANCA)

蘋果人優(yōu)球蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠抗中性粒核周抗體(pANCA)

Mobilicoccus人游離血紅蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)

木霉人魚精蛋白1Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)

淡黃木霉 人一氧化碳血紅蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠15脂加氧(15-LO/LOX)

嗜幾丁質(zhì)類芽孢桿菌人血小板相關(guān)免疫球蛋白Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠15脂加氧(15-LO/LOX)

潮間交替紅色桿菌人血小板相關(guān)補體3Bacillus subtilis subsp. subtilis小鼠β干擾(IFN-β/IFNB)

鋅指蛋白598抗體硬柄小皮傘家貓肺細(xì)胞

鋅指脂蛋白-1b抗體白環(huán)粘奧德蘑大額牛腎細(xì)胞

調(diào)節(jié)蛋白1抗體毛木耳恒河猴皮膚細(xì)胞

鋅指/環(huán)指蛋白1抗體潔麗香菇綿羊皮膚細(xì)胞
p53amyloid formation抑制劑(ReACp53)紫色直絲鏈霉 瑞奈

秀珍菇 瑞替加濱

節(jié)桿屬 鹽酸阿米替林

香菇 1-(4-叔丁基苯基)-3-(4-甲氧基苯基)-1,3-二酮

中國漢納酵母 渥曼青霉

黑曲霉 阿莫西林

干酪乳桿 霉

鹵水糖螺 尼莫地平

漢遜德巴酵母 頭孢哌酮

鐘器腐霉 他巴唑

柑橘青霉 鹽酸氨林

北京芽孢桿 去氧野艽霉鹽酸鹽

黑根霉 復(fù)達(dá)欣

歐文氏屬 喹乙

固氮 諾貝特