商品介紹:
PD168393是一個強的,不可逆轉(zhuǎn)的EGFR抑制劑,IC50是0.7nM. 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:194423-15-9 純度:98.28% 分子量:369.22 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:EGFR抑制劑(PD168393)
英文名稱:PD168393
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞,細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
傳染性支氣管炎病Bacillus thuringiensis鴨白介8(IL-8/CXCL8)
短雙歧桿菌Bacillus thuringiensis鴨白介4(IL-4)
球孢白僵菌Bacillus thuringiensis鴨白介4(IL-4)
串泡兩型毛霉原變種Bacillus thuringiensis鴨白介2(IL-2)
螺旋聚孢霉Bacillus thuringiensis鴨白介2(IL-2)
硝鹽還原菌Bacillus thuringiensis鴨子碳酐(CA)
巴氏醋桿菌Bacillus thuringiensis鴨子碳酐(CA)
葡枝根霉Bacillus thuringiensis鴨抗凝血抗體(aPT1/aPT2)
米根霉Bacillus thuringiensis鴨抗凝血抗體(aPT1/aPT2)
假單胞菌屬Bacillus thuringiensis鴨(cAMP)
諾氏菌Bacillus thuringiensis鴨(cAMP)
新疆鹽地桿菌Bacillus thuringiensis鴨免疫球蛋白E(IgE)
環(huán)帶狀枝頂孢Bacillus thuringiensis鴨免疫球蛋白E(IgE)
釀酒酵母Bacillus thuringiensis鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)
細(xì)鏈格孢Bacillus thuringiensis鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)
金黃色葡萄球菌Bacillus thuringiensis鴨病性腸炎病(DEV)
Smad7抗體拜賴青霉蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草)(斜面)
超氧化物歧化1抗體銅/鋅過氧化物歧化SOD螺旋巴克斯霉納霉鏈霉菌
超氧化物歧化2抗體巴恩真青霉大慶食烴菌
胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體黃孢平革菌耐鹽海桿菌
EGFR抑制劑(PD168393)Synaptogyrin 4 英文名稱: 神經(jīng)細(xì)胞囊泡循環(huán)蛋白4抗體 0.1ml
E Tag 英文名稱: E Tag標(biāo)簽抗體 0.1ml
β-連環(huán)蛋白抗體(β鏈接素) Anti-β catenin/β-cats 0.1ml
Anti-T Beta10/FITC 熒光素標(biāo)記胸腺素β10抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-HP1 alpha (Tyr24) 磷酸化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅) 規(guī)格 1ml
MIP-3 beta/ELC/CCL19(Macrophage Inflammatory Protein 3 Beta) 巨噬細(xì)胞炎性蛋白19抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg