PDE-5抑制劑（Avanafil）

PDE-5抑制劑（Avanafil）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-MCM2/FITC 熒光素標(biāo)記染色體維持缺陷蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TIGAR humen/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人TIGAR蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Activin A Re

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
富馬替芬（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ropinirole HCl腫瘤/抗原13抗體包裝100g

富馬替芬雜質(zhì)I（10-氧基-4-（1-基-4-...英文名稱： Ropivacaine hydrochloride 鈣反應(yīng)因子抗體包裝25g

富馬伊布利特(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ropivacaine hydrochloride 分裂周期蛋白2亞型1抗體包裝100g

富馬異吡侖（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Rosuvastatin Calcium20號染色體開放閱讀框74抗體包裝25g

甘膽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Rosuvastatin Calcium促腎上腺皮質(zhì)釋放激受體2抗體包裝100g

甘雙唑鈉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sitagliptin phosphate monohydrate20號染色體開放閱讀框132抗體包裝25g

甘草二（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sitagliptin phosphate monohydrateIV型膠原蛋白/4型膠原蛋白/膠原蛋白4抗體包裝500g

甘精胰島(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Spectinomycin Hydrochloride 煙堿型乙酰膽堿受體B2抗體包裝1g

甘露（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Spectinomycin Hydrochloride 20號染色體開放閱讀框70抗體包裝100g

甘羅溴銨（標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Tamsulosin hydrochloride 親環(huán)蛋白（親環(huán)）PPIB抗體包裝1g

桿菌肽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ithromycin 8號染色體開放閱讀框34抗體包裝25g

高藜蘆(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： misartanM鈣粘附分子抗體包裝5g

格列本脲（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： misartan凋亡誘導(dǎo)蛋白NALP3抗體包裝100g

格列吡 （標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Isoniazid周期B2抗體包裝25g

格列喹(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Isoniazid鈣腔蛋白包裝5g

: LMG2715=ATCC8199=DSM30176資源名稱: Pantoeastewartiisubsp.stewartii 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6試劑盒烏藥內(nèi)酯;Linderane

產(chǎn)氣莢膜梭菌 毒A型Clostridium│perfringens Type A 質(zhì)量規(guī)格：potency>900ug/mg,BR鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4試劑盒維生K3;Menadione

: ATCC27853、AS1.2387資源名稱: 銅綠假單胞菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR鋅指蛋白RIZ試劑盒維生B12;Vitamin B12
PDE-5抑制劑（Avanafil）腺苷活化蛋白激γ3抗體可溶性核因子κB受體活化因子配(sRANKL)檢測試劑盒sRANKL ELISA Kit

腺苷單磷活化蛋白激β2抗體可溶性Toll樣受體9(sTLR9/sCD289)檢測試劑盒sTLR9/sCD289 ELISA Kit

磷化周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體可溶性Toll樣受體4(sTLR4)檢測試劑盒sTLR4 ELISA Kit

周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體可溶性Toll樣受體2(sTLR2)檢測試劑盒sTLR2 ELISA Kit

磷化蛋白激B2抗體可溶性P選擇(sP-selectin)檢測試劑盒sP-selectin ELISA Kit

磷化鐵蛋白Fe65抗體可溶性Endoglin(ENG/sCD105)檢測試劑盒ENG/sCD105 ELISA Kit

磷化鐵蛋白Fe65抗體可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測試劑盒B7-2/sCD86 ELISA Kit

磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體可溶性CD40配體(sCD40L)檢測試劑盒sCD40L ELISA Kit

磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體可溶性CD30配體(sCD30L)檢測試劑盒sCD30L ELISA Kit