Bcr-Abl抑制劑(GNF-5)

Bcr-Abl抑制劑(GNF-5)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-NIT2/FITC 熒光素標(biāo)記抗NIT2蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-WIP1/FITC 熒光素標(biāo)記原癌基因WIP1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
抗酪蛋白抗體 anti-bov Casein 1.0ml
Goat Anti-Chick

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

 

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
商品介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。

小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅱ(TGFβR2)ELISA試劑盒 ，英文名： TGFβR2 ELISA Kit

犬胰島素受體β(ISR-β)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 96T/48T

犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)免疫試劑盒 Dog iercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA Kit

英文名稱HumanansferrieceptorELISAKit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

超氧化物歧化酶(SOD)紅細(xì)胞裂解樣品制備試劑盒50次

Ratglycogensyhasekinase,GSKELISA試劑盒大鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-1sRⅠ ELISA Kit

大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA檢測(cè)試劑盒RatansformingGrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAkit 96T/48T

人Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒 Human SDC1 ELISA Kit

英文名稱MouseDHEA-SELISAKit小鼠去氫表雄同(DHEA-S)規(guī)格：96T/48T

TSH-BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25次

rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豬水通道蛋白4(AQP4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Human tissue inhibitors of maix metalloproteinases 1 (TIMP-1) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒

GuineaPigEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝

CLIAKitforANG-4(MouseAngiopoietin4)ELISAKit小鼠血管生成素4規(guī)格：48T/96T

血液丁酰膽堿酯酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

PorcineFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit豬凋亡相關(guān)因子(FAS/CD95)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Bcr-Abl抑制劑(GNF-5)SISP1 英文名稱： 應(yīng)激誘導(dǎo)分泌蛋白1抗體 0.1ml

Phospho-eNOS (Thr113) 英文名稱： 磷酸化一氧化氮合成酶3(內(nèi)皮型)抗體 0.1ml

N-鈣粘附分子抗體 Anti-N-cadherin 0.1ml

Anti-Phospho-SGK1 (Ser422) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PAK2 (Ser20) 磷酸化p21激活激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

Akt/PKB 蛋白激酶B(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg