產(chǎn)品屬性:
中文名稱:4-羥基脯氨酸抑制劑(Malotilate)
英文名稱:Malotilate
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
商品介紹:
Malotilate可作用于肝細(xì)胞,促進(jìn)其RNA合成,激活核糖體,提高蛋白質(zhì)合成能力,從而激活肝功能并抑制肝纖維化,還能抑制肝內(nèi)4-羥基脯氨酸量的增加。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):59937-28-9 別名:NKK 105 分子量:288.38 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β受體Ⅰ(TGFβR1)ELISA試劑盒 ,英文名: TGFβR1 ELISA Kit
犬骨橋素(OPN)ELISA檢測(cè)試劑盒CanineOsteopoin,OPNELISAKit 96T/48T
犬K1(VK1)免疫試劑盒 Canine Vitamin K1,VK1 ELISA Kit
英文名稱HumanansformingGrowthfactorβ1ELISAkit人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)規(guī)格:96T/48T
超氧化物歧化酶(SOD)紅細(xì)胞裂解樣品制備試劑盒50次
RatGonadoopin-releasinghormonereceptor,GHRELISA試劑盒大鼠促性腺激素釋放激素受體(GHR)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Explicit peptide (extein) ELISA Kit 人外顯肽(extein)ELISA試劑盒
HumanskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISAKit 人橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
HumanCardiacmyosin-lightchains1,CMLC-1ELISA試劑盒人心肌肌凝蛋白輕鏈1(CMLC-1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
煮沸法質(zhì)粒/柯斯質(zhì)粒DNA快速抽提試劑盒20次
humansolubleclusterofdiffereiation28,sCD28ELISAKit人可溶性CD28(sCD28)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬瘦素(LEP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Human maix Gla protein (MAT) ELISA Kit 人基質(zhì)裂解蛋白(MAT)ELISA試劑盒
guineapigniicoxide,NOELISAKit 豚鼠血清一氧化氮(NO)ELISA試劑盒 96T/48T 分裝
CLIAKitforANG-4(HumanAngiopoietin4)ELISAKit人血管生成素4規(guī)格:48T/96T
血液丁酰膽堿酯酶活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測(cè)試劑盒20次
PorcineEsadiol,E2ELISAKit豬雌二醇(E2)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
4-羥基脯氨酸抑制劑(Malotilate)ANUP 英文名稱: 抗蛋白ANUP抗體 0.2ml
EEF2 英文名稱: 真核翻譯延長因子2抗體 0.2ml
核小體組裝蛋白1抗體 Anti-NAP1 1ml
Anti-Phospho-SGK1 (Ser78)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PAK2(Ser141) 磷酸化p21激活激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml
2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)血清白蛋白Multi-class antibodies規(guī)格: 5mg
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)