PI3K p110δ抑制劑(PI-3065)

PI3K p110δ抑制劑(PI-3065)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-KLK14/FITC 熒光素標(biāo)記14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化SMAD抗體IgGMulti-class anti

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
立枯絲核菌乙脫氫家族3成員A1抗體Human Fcγ(Fc Fragment of IgG) ELISA Kit豬ELISA Kit

盤長孢狀盤孢磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體Human miRNA-210 ELISA Kit豬組織因子(TF)免疫試劑盒

紅鬼筆γ2肌動蛋白抗體Human anti-SARS-CoV2(N) IgG ELISA Kit豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒

伯克霍爾德菌gp130結(jié)合蛋白GAM抗體Human ALOX5(Arachidonate Lipoxygenase 5) ELISA Kit豬組(HIS)免疫試劑盒

環(huán)圈鏈霉菌繆勒激2型受體抗體Human Hsd17b13( 17-beta-hydroxysteroid dehydrogenase 13) ELISA Kit豬轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR)免疫試劑盒

青霉激活受體1A抗體Human SEPTIN7(septin-7) ELISA Kit豬轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)免疫試劑盒

阿舒假囊酵母激活受體2A抗體Human anti-SARS-CoV2(N) IgM ELISA Kit豬轉(zhuǎn)錄因子AP-1 免疫試劑盒

曲霉屬激活受體2B抗體Human anti-2019 nCoV(S) IgM ELISA Kit豬轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)免疫試劑盒

解脂假絲酵母2號染色體開放閱讀框88抗體Human anti-2019 nCoV(S) IgG ELISA Kit豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ)免疫試劑盒

白布勒擔(dān)孢酵母G蛋白偶聯(lián)受體ARHGEF18抗體Human OTUD5(OTU domain containing 5) ELISA Kit豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ)免疫試劑盒

白靈側(cè)耳激活受體1B抗體Human MARK2 ELISA Kit豬主要急性期蛋白(MAP)免疫試劑盒

靈芝屬雄激受體相關(guān)蛋白24抗體Human MARK3 ELISA Kit豬腫瘤壞死因子α(TNF-α)免疫試劑盒

黑木耳淀粉樣肽前體蛋白抗體（C端）Human MARK1 ELISA Kit豬中性粒明膠相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌腺苷環(huán)化2抗體Human MARK4 ELISA Kit豬脂聯(lián)受體2(ADIPOR2)免疫試劑盒

玉米大斑病菌載脂蛋白C3抗體Human MARS ELISA Kit豬脂聯(lián)受體1(ADIPOR1)免疫試劑盒

棕褐小單孢菌載脂蛋白E4抗體Human MARVELD2 ELISA Kit豬脂聯(lián)(ADP)免疫試劑盒

金黃色葡萄球菌Staphylococcus│aureus 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR成纖維生長因子23試劑盒紅杉

卡弗擬盤多毛孢Pestalotiopsis│carveri 質(zhì)量規(guī)格：>98.5%，JP 成纖維生長因子21試劑盒合成辣椒堿

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：98~101%,BR成纖維生長因子13試劑盒蒿乙
PI3K p110δ抑制劑(PI-3065)組蛋白H2AZ抗體脫氧野尻霉(標(biāo)準(zhǔn)品) E64d,E-64d

熱休克因子2結(jié)合蛋白抗體拓?fù)涮婵蝶}鹽（標(biāo)準(zhǔn)品） dCMP,2Na

HEATR2蛋白抗體瓦松（標(biāo)準(zhǔn)品） 2'-Deoxyadenosine 5'-monophosphate

鐵硫簇整合同源物2蛋白抗體萬丈深（標(biāo)準(zhǔn)品） FAD-Na2

麻疹病血凝抗體萬丈深（綠莖還陽參）（標(biāo)準(zhǔn)品） GTP, 3sodium Salt

同源盒蛋白HOXC5抗體王不留行（標(biāo)準(zhǔn)品） 5-IMP，2Na

轉(zhuǎn)錄因子HES4抗體王不留行環(huán)肽A Uridine 5'-diphosphate sodium salt from

造血干特異性相關(guān)結(jié)合蛋白3抗體王不留行環(huán)肽B 5'-UMP-Na2

HDHD1蛋白抗體王不留行黃苷（標(biāo)準(zhǔn)品） 2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Disodium salt(dAMP-Na2)