EGFR抑制劑(AZD-9291 dimesylate)

EGFR抑制劑(AZD-9291 dimesylate)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PPAR-delta /FITC 熒光素標(biāo)記D型-過氧化酶活化增生受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-Biotin Whole serum 兔抗生物素抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
干擾素-γ抗體 Anti-IFN

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
米曲霉Ensifer meliloti

越南芽孢桿菌Ensifer meliloti

小孢根霉華變種Ensifer meliloti

海洋南海所菌Ensifer meliloti

寡雄腐霉Ensifer meliloti

乳乳球菌乳亞種Ensifer meliloti

鏈霉菌Ensifer meliloti

串珠鐮孢*Ensifer meliloti

大腸埃希氏桿菌Azotobacter chroococcum

扣囊復(fù)膜孢酵母Azotobacter chroococcum

黑曲霉Azotobacter chroococcum

金針菇BPaenibacillus polymyxa

黃絮鱗鵝膏菌Sphingomonas sanxangenens

丁梭菌Enterobacter cloacae

球毛殼Halomonas daqingensis

枯草芽孢桿菌Acinetobacter xiamensis

豬乙脫氫家族3成員A1抗體人心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫試劑盒阿彼斯基姆

豬組織因子(TF)免疫試劑盒磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體人心鈉肽(ANP)聯(lián)免疫試劑盒阿多尼弗林堿

豬組織型纖溶原激活劑(t-PA)免疫試劑盒γ2肌動蛋白抗體人IL-17 阿波糖

豬組(HIS)免疫試劑盒g(shù)p130結(jié)合蛋白GAM抗體人IL-17 阿馬堿
EGFR抑制劑(AZD-9291 dimesylate)ZNF288 英文名稱： 鋅指蛋白288抗體 0.2ml

DLK1 英文名稱： 穿膜蛋白DLK1抗體(C端) 0.1ml

錨定蛋白G抗體 Anti-Ankyrin G/ANK-3/ankyrin 3 0.1ml

Anti-ZNF268(1a)/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指脂蛋白-1a抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 磷酸化雌激素受體α抗體 規(guī)格 0.1ml

Cyr61/IGFBP10/CCN1(cysteine rich 61) 富半胱氨酸肝素結(jié)合蛋白61抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg