MIF d-多巴色素互變異構(gòu)酶抑制劑（ISO-1）

MIF d-多巴色素互變異構(gòu)酶抑制劑（ISO-1）公司*的產(chǎn)品：Anti-Phospho-MK6 (Ser202)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化原活化蛋白激酶MKK6抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TRAF3/CD40bp /FITC 熒光素標(biāo)記CD40結(jié)合蛋白/CD40受體相關(guān)因子1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱(chēng)：MIF d-多巴色素互變異構(gòu)酶抑制劑（ISO-1）

英文名稱(chēng)：ISO-1

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

猴頭自噬相關(guān)基因AMBRA1抗體Human C1orf31(Cytochrome c oxidase assembly factor 6 homolog) ELISA Kit豬脂肪合成(FAS)免疫試劑盒

Frigoribacterium磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體Human C10orf58(Redox-regulatory protein FAM213A) ELISA Kit豬脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)免疫試劑盒

大腸桿菌磷化自噬相關(guān)蛋白4C抗體Human NY-ESO-1(Cancer/testis antigen 1) ELISA Kit豬脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體Human Caspase 12 ELISA Kit豬脂蛋白磷脂A2(Lp-PLA2)免疫試劑盒

菊異莖點(diǎn)霉磷化失調(diào)癥蛋白1抗體Human CD320 ELISA Kit豬脂蛋白α(Lp-α)免疫試劑盒

蒼黃鏈霉菌脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體Human TMPRSS15(Enteropeptidase) ELISA Kit豬正常T表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)免疫試劑盒

假單孢菌磷化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體Human SPAST(Spastin) ELISA Kit豬粘膜血管地址黏附分子1(MADCAM1)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體Human TOM20(translocase of outer mitochondrial membrane 20 homolog) ELISA Kit豬粘蛋白/粘液5B(MUC5B)免疫試劑盒

三葉草根瘤菌磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體Human MLKL(mixed lineage kinase domain-like) ELISA Kit豬粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)免疫試劑盒

委內(nèi)瑞拉鏈霉菌磷化活化復(fù)制因子2抗體Human HSD3B7(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase type 7) ELISA Kit豬粘蛋白/粘液2(MUC2)免疫試劑盒

紅色紅曲菌 磷化鈉ATP蛋白a1抗體Human MVK(Mevalonate kinase) ELISA Kit豬粘蛋白/粘液1(MUC1)免疫試劑盒

冬蟲(chóng)夏草磷化鈉ATP蛋白a1抗體Human CRTC2(CREB-regulated transcription coactivator 2) ELISA Kit豬早老2(PS-2)免疫試劑盒

莫哈韋芽孢桿菌乙酰羧化抗體Human total SOD(superoxide dismutase) ELISA Kit豬早老1(PS-1)免疫試劑盒

海洋桿菌磷化乙酰羧化抗體Human CD97(CD97 antigen) ELISA Kit豬載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒

暗孢節(jié)菱孢磷化Ack1抗體Human TLR8(Toll-like receptor 8) ELISA Kit豬載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒

鴨艾美耳球蟲(chóng)磷化腺苷單磷活化蛋白激α1抗體Human peptidoglycan(peptidoglycan) ELISA Kit豬載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>95%，BR成纖維生長(zhǎng)因子10試劑盒漢防己

: B700資源名稱(chēng): 巨大芽孢桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR巢蛋白1試劑盒甘草單鹽

赫爾曼埃希氏菌Escherichia│hermannii 質(zhì)量規(guī)格：活>200 NADP units/mg，BC超敏熱休克蛋白70試劑盒對(duì)二基
MIF d-多巴色素互變異構(gòu)酶抑制劑（ISO-1）組蛋白H3K9轉(zhuǎn)移4抗體紅景天（標(biāo)準(zhǔn)品） PR171 intermedaite II

離子通道蛋白家族成員3抗體紅景天苷(標(biāo)準(zhǔn)品) (alphaS)-alpha-[(4-Morpholinylacetyl)amino]benzenebutanoyl-L-leucyl-L-phenylalanine

角蛋白82抗體紅景天；草質(zhì)甙； Boc-HPh-Leu-Phe-Ome

20號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體紅芪（標(biāo)準(zhǔn)品） 5(6)-Carboxy-X- rhodamine; 5(6)-ROX 

角膜蛋白多糖抗體紅曲（特殊發(fā)酵）（標(biāo)準(zhǔn)品） 5-hydroxy-2-adamantanone

含賴(lài)卷曲螺旋蛋白1抗體葒草苷（標(biāo)準(zhǔn)品） Eszopiclone

激肽釋放3/舒血管3抗體厚樸(厚樸)（標(biāo)準(zhǔn)品） Eszopiclone

上皮鋅指蛋白1, 2, 4抗體厚樸酚(標(biāo)準(zhǔn)品) Triamcinolone Acetonide Acetate

腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體厚樸總酚(對(duì)照品) Halofuginone