公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞生物學研究有以下幾個方面:
細胞生物學的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細胞核、染色體以及基因表達的研究;
②生物膜與細胞器的研究;
③細胞骨架體系的研究;
④細胞增殖及其調(diào)控;
⑤細胞分化及其調(diào)控;
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細胞的起源與進化;
⑧細胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:酪氨酸激酶抑制劑(Sulfatinib)
英文名稱:Sulfatinib
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|1mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
Sulfatinib(HMPL-012)是一種有效且高度選擇性的針對VEGFR1/2/3,F(xiàn)GFR1和CSF1R的酪氨酸激酶抑制劑,IC50值在1到24nM之間。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:1308672-74-3 別名:HMPL-012 純度:98.34% 分子量:480.58 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)
流感嗜血桿菌Brevibacillus sp.大鼠巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)
釀酒酵母Bacillus licheniformis大鼠層連蛋白/板層(LN)
凝結(jié)芽胞桿菌Bacillus cereus大鼠層連蛋白/板層(LN)
尖孢鐮孢Paenibacillus sp.大鼠白介6(IL-6)
綠色木霉Bacillus licheniformis大鼠白介6(IL-6)
糙皮側(cè)耳Bacillus sp.大鼠白介4(IL-4)
大腸埃希氏桿菌Bacillus sp.大鼠白介4(IL-4)
枯草芽孢桿菌Escherichia coli大鼠白介2(IL-2)
釀酒酵母Bacillus subtilis subsp. subtilis大鼠白介2(IL-2)
香菇Bacillus sp.大鼠白介1α(IL-1α)
變幻青霉Bacillus sp.大鼠白介1α(IL-1α)
Boseongicola aestuariiBacillus sp.大鼠白介18(IL-18)
皮爾瑞俄類芽孢桿菌Bacillus sp.大鼠白介18(IL-18)
海南吉爾霉Bacillus sp.大鼠白介10(IL-10)
稻黑孢霉Bacillus sp.大鼠白介10(IL-10)
新月彎孢Bacillus sp.大鼠胰島樣生長因子2(IGF-2)
血管生成受體2抗體嗜冷單胞菌龜裂鏈霉菌巴龍霉亞種
細胞粘合抗體C端腱糖蛋白-C固生蛋白抗體木糖氧化無色桿菌反硝化亞種褐色鏈霉菌
TANK抗體塔斯曼尼亞歐文氏菌紅曲霉菌屬菌種
腫瘤易感基因101蛋白抗體成團泛菌黃色鏈霉菌
酪氨酸激酶抑制劑(Sulfatinib)釀酒酵母 再生纖維透析袋(10000)
越南芽孢桿 三七皂苷R1
膠孢 連翹苷
產(chǎn)紫青霉 貝母乙
*杏葉斑鏈格孢 再生纖維透析袋(10000)
柑橘青霉 貝母甲
繩狀籃狀 2,3,5,4'-四羥基二苯乙烯葡萄糖苷
溜曲霉 再生纖維透析袋(10000)
竹針孢座囊 松脂二葡萄糖苷
泡盛曲霉 吳茱萸次堿
哈茨木霉 再生纖維透析袋(25000)
深紅酵母 再生纖維透析袋(25000)
謝瓦散囊 吳茱萸堿
雜曲霉 黃柏酮
白地霉 靛藍