tankyrases抑制劑(MN-64)

tankyrases抑制劑(MN-64)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-PSD-95/FITC 熒光素標(biāo)記突觸后密度蛋白95抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Donkey Anti-human IgG Whole serum 驢抗人IgG抗血清Multi-class antibodies規(guī)格： 1ml
胰島素1-51蛋白抗體 Anti-Insulin 0.1m

商品介紹：

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

麥根腐平臍蠕孢Leucosporidium scottii

格氏李斯特氏菌Lipomyces starkeyi

阿貢納沙門氏菌Trigonopsis variabilis

米根霉Metschnikowia pulcherrima

納瓦河部落奇異球菌Prototheca stagnora

長雙歧桿菌Rhodosporidium toruloides

大腸桿菌Bullera oryzae

木霉Bullera sinensis

pGro7Bullera pseudoalba

木賊鐮孢Wickerhamiella domercquii

嗜松青霉Yarrowia lipolytica

點柄乳牛肝Saccharomyces cerevisiae

泛養(yǎng)副球菌Saccharomyces cerevisiae

枯草芽孢桿菌Pachytichospora transvaalensis

平菇Pachysolen tannophilus

葫蘆細(xì)基格孢Schizosaccharomyces malidevorans

小鼠免疫球蛋白D(IgD)免疫試劑盒琥珀裂解抗體人纖維連接相關(guān)抗原(FRA) 內(nèi)酯

小鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒精酰tRNA合成抗體人纖維連接相關(guān)抗原(FRA) 內(nèi)酯甲

小鼠輪狀病(RV)抗原(Ag)免疫試劑盒真核翻譯起始因子2C3抗體人胃泌抗體(GCA) 內(nèi)酯

小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒真核翻譯起始因子2C4抗體人胃泌抗體(GCA) 乙
tankyrases抑制劑(MN-64)SYNPR/Synaptoporin 英文名稱： 突觸囊泡蛋白抗體 0.2ml

EDG1 英文名稱： 內(nèi)皮細(xì)胞分化鞘脂G蛋白偶聯(lián)受體1抗體 0.1ml

CREB結(jié)合蛋白抗體 Anti-CBP 0.1ml

Anti-ULBP1/N2DL1/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠UL16結(jié)合蛋白1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Histone H3 (Ser28) 磷酸化組蛋白H3抗體 規(guī)格 0.1ml

VEGF(Vascular endothelial growth factor) 血管內(nèi)皮生長因子(多肽抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg