公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:JAK2抑制劑(NVP-BSK805 dihydrochloride)
英文名稱:NVP-BSK805 dihydrochloride
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
NVP-BSK805雙鹽酸鹽(BSK805)是ATP競爭性JAK2抑制劑,IC50為0.5nM,比對JAK1,JAK3和TYK2的抑制性高超出20倍。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! 別名:BSK805 dihydrochloride 純度:98.0% 分子量:563.47 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
糖多孢菌Escherichia coli大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(MIS/AMH)
秦氏蜜環(huán)菌Escherichia coli大鼠雄激(androgen)
耐久腸球菌Escherichia coli大鼠雄激(androgen)
嗜熱脂肪地芽胞桿菌(Geobacillus stearothermophilus )ATCC 7953*Escherichia coli大鼠Toll樣受體4(TLR4)
依諾斯類芽孢桿菌Escherichia coli大鼠Toll樣受體4(TLR4)
親和鏈霉菌Escherichia coli大鼠多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)
貝倫格葡萄座腔菌梨生?;?/span>Escherichia coli大鼠多巴轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(DAT)
巴氏醋桿菌Escherichia coli大鼠多巴D2受體(D2R)
褪色沙雷氏菌(粘質(zhì)沙雷氏菌)Escherichia coli大鼠多巴D2受體(D2R)
金黃殼囊孢Escherichia coli大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
耐冷冷桿菌Escherichia coli大鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)
根瘤菌Escherichia coli大鼠CD44分子(CD44)
達(dá)氏擬諾氏菌Escherichia coli大鼠CD44分子(CD44)
伯頓絲孢畢赤酵母Escherichia coli大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)
豬丹絲菌Escherichia coli大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)
蕈狀芽孢桿菌Escherichia coli大鼠白介1受體拮抗劑(IL1Ra)
磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體環(huán)帶小薄孔菌豹貓肺成纖維樣細(xì)胞
磷肌磷脂PLCZ1抗體伯克邦氏孔菌赤狐肺成纖維樣細(xì)胞
磷脂磷2b抗體緊密蠟孔菌赤狐腎上皮樣細(xì)胞
蛋白激A調(diào)節(jié)亞基a1抗體肉桂色集毛孔菌赤狐皮膚成纖維樣細(xì)胞
JAK2抑制劑(NVP-BSK805 dihydrochloride)黑曲霉 常春藤苷H
簡單芽孢桿 Hederacolchiside A1
香栓孔 齊墩果酸-3-O-β-D葡萄糖( 1→3)-α-L-鼠李糖(1→2)-α-L-阿伯糖苷
米根霉 司盤40
釀酒酵母 黃花敗醬甙C
球孢白僵 司盤20
Coriobacterium glomerans 五味子
尿酸氧化節(jié)桿 環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑V601
聚生殼 遠(yuǎn)志皂苷B
粟酒裂殖酵母 藤黃酸
平臍蠕孢 環(huán)偶氮脒類引發(fā)劑VA-044
米曲霉 構(gòu)樹堿A
橄欖色盾殼霉 11-羥基柳杉
大腸埃希氏 3β-乙酰氧基-7,25-甘遂二烯-24(R)-
棒彎孢 麻楓樹酮B