PDE1抑制劑（Vinpocetine）

PDE1抑制劑（Vinpocetine）公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-Phospho-MYPT1 (Ser668) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肌球蛋白磷酸酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-TRF1/FITC 熒光素標(biāo)記端粒結(jié)合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh A

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時(shí)內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
酰次烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Myokinase癌基因ERG3抗體包裝1g

?；昝仔?/span>O英文名稱： Phosphodiesterase II from Bovine Spleen豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K88-K99抗體包裝25g

酰芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： SuccinimideFAS凋亡抑制分子3抗體包裝5g

酰烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Bromouridine纖維束1抗體包裝25g

酰新烏頭原堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： ADA buffer, disodium salt叉頭蛋白P3抗體包裝5g

酰氧化芍藥苷英文名稱： Albumin, from bovine Protease free免疫球蛋白G Fc段受體I包裝1g

比靈,右旋荷包牡丹堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Aluminum stearate叉頭蛋白M1抗體包裝5g

蓽茇（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Bismuth(III) nitrate pentahydrate磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝500ml

蓽澄茄（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Calcium phosphate, dibasic, dihydrate磷化粘著斑激抗體包裝100ml

蓖麻子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cerium(III) carbonate, hydrate絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體包裝25ml

蝙蝠葛堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Chymotrypsinogen A肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）包裝10g

蝙蝠葛諾林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Cibacron blue 3G-A13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)包裝50g

蝙蝠葛蘇林堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： DEAE Dextran濾泡樹突分泌蛋白抗體包裝25g

扁柏雙黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Fluridone纖維母生長因子13抗體包裝5g

扁桃苷/苦杏仁苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Histamine骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體包裝100g

淺灰鏈霉菌Streptomyces│griseolus 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR瘦試劑盒染料木;Genistein

白乳菇Lactarius│piperatus (L.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品受體型酪蛋白磷樣N試劑盒;

鴨瘟病毒Alphaherpesvirinae│Duck plague virus 質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%受體TNFRSF結(jié)合絲蘇激2試劑盒七葉皂苷 IIb;Escin IIb
PDE1抑制劑（Vinpocetine）信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5(STAT5)抗原16α-羥松苓新Human

信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗原17-Hydroxy sprengerinin CHuman

雌激硫轉(zhuǎn)移抗原2''-O-p-反式香豆酰葒草苷Human

類泛蛋白2''-O-p-香豆酰牡荊Human, Mouse

磷化微管相關(guān)蛋白多肽2''-O-鼠李糖羊藿次苷IIHuman, Mouse

微管相關(guān)蛋白2抗原2'-O-苦參Human

微管相關(guān)蛋白1A抗原2,3,5,4-四羥二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷Human

新型抑癌因(多肽)2,3,5,4-四羥二乙烯葡萄糖苷,二乙烯苷(標(biāo)...Human, Mouse, Rat

轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗原2,3-脫氫維Human, Mouse