以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
STING agonist-1(G10)是一種新型人類(lèi)特異性的STING激動(dòng)劑,針對(duì)新出現(xiàn)的甲病毒,可引發(fā)抗病毒活性,G10有效抑制甲病毒屬委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎病毒(VEEV)復(fù)制(IC90=24.57μM)。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):702662-50-8 別名:G10 純度:99.06% 分子量:430.88 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
去斑蝥鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1-Tridecene γ-微管蛋白GCP4抗體包裝5g
去烏藥堿鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1-Tetradeceneγ-微管蛋白GCP6抗體包裝500g
去氧基姜黃英文名稱(chēng): 1-Pentadeceneβ-葡萄糖苷1抗體包裝100ml
去氧基姜黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1-Hexadecene甘裂解系統(tǒng)H蛋白抗體包裝25ml
去氧基麻醉椒英文名稱(chēng): 1-Heptadecene15號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框58抗體包裝25g
去異波爾定(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 1-Nonadecene淀粉結(jié)合域蛋白1抗體包裝5g
去澤拉木(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 2-Bromo-4'-phenylacetophenone延伸因子G1抗體包裝100g
去芹菜糖桔梗皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dabsyl Chloride β葡萄糖苷2抗體包裝25g
去芹糖桔梗皂苷D3英文名稱(chēng): O-4-Nitrobenzylhydroxylamine Hydrochlorideβ葡萄糖苷3抗體包裝100g
去氫厄弗酚英文名稱(chēng): 7-Acetoxy-4-bromomethylcoumarin膠質(zhì)母瘤相關(guān)蛋白GBAS抗體包裝1g
去氫二異丁香酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Br-Mmc (=4-Bromomethyl-7-methoxycoumarin)紅糖苷α1抗體包裝25g
去氫茯苓英文名稱(chēng): 3-Bromomethyl-7-methoxy-1,4-benzoxazin-2-one G蛋白結(jié)合蛋白1抗體包裝5g
去氫鉤藤堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): 4-Bromomethyl-6,7-dimethoxycoumarin G蛋白結(jié)合蛋白4抗體包裝1g
去氫毛鉤藤堿英文名稱(chēng): DBD-CO-Hz [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(N-hydrazinocarbonylmethyl-N-methyl)amino-2,1,3-benzoxadiazole] G蛋白結(jié)合蛋白6體包裝25g
去氫木香內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): NBD-CO-Hz [=4-(N-Hydrazinocarbonylmethyl-N-methylamino)-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole] 鳥(niǎo)苷環(huán)化激活蛋白1抗體包裝5g
結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格:>99%,標(biāo)準(zhǔn)品,一合物凝溶膠蛋白試劑盒木蝴蝶苷A;Oroxin A
皺蓋假芝(血芝)Amauroderma│rude 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,一合物凝聚試劑盒漏蘆甾;Rhapontisterone
斜臥青霉Penicillium│decumbens 質(zhì)量規(guī)格:>99%,USP31,可用于培養(yǎng)檸檬合成,線(xiàn)粒體試劑盒羅漢果甜IV;Mogroside IV
STING激動(dòng)劑(STING agonist-1)一般受體磷肌相關(guān)支架蛋白1抗體龍膽(龍膽)(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
谷受體紅藻離子5抗體龍膽花(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
棕櫚酰轉(zhuǎn)移GODZ抗體龍膽苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白1抗體龍膽;2,5-二羥(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G丁受體β2+3/GABAA Rβ2+GABAA Rβ2抗體龍脷葉(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G蛋白α抗體龍腦(標(biāo)準(zhǔn)品) Activated charcoal
G蛋白β樣蛋白抗體植提標(biāo)準(zhǔn)品 Activated charcoal
通用轉(zhuǎn)錄因子GTF2B抗體龍血竭(標(biāo)準(zhǔn)品)
磷化gp130抗體龍血A(標(biāo)準(zhǔn)品) Molecular sieves Type 13X