商品介紹:
Ensartinib是一種有效的ALK抑制劑,用于治療非小細(xì)胞肺癌。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1365267-27-1 別名:X-396 純度:98.02% 分子量:547.41 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
ALK抑制劑(Ensartinib) | Ensartinib | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
細(xì)鏈格孢雌激受體Anti-GPR35 Antibody人抗信號(hào)識(shí)別顆??贵w(SRP)
豇豆慢生根瘤菌重組增強(qiáng)型綠色熒光Anti-GPR42 Antibody人抗信號(hào)識(shí)別顆粒抗體(SRP)
雙歧雙歧桿菌堿性成纖維生長(zhǎng)因子受體-1(多肽抗原)Anti-GPR34 Antibody人封閉抗體(BA)
產(chǎn)紫青霉人纖維蛋白原Anti-GPR37L1 Antibody人封閉抗體(BA)
保亭油脂酵母牛纖維蛋白原Anti-GPR50 Antibody人抗膜DNA抗體(cmDNA)
匍枝根霉(黑根霉)8/第八/第八因子相關(guān)抗原Anti-GPR63 Antibody人抗膜DNA抗體(cmDNA)
產(chǎn)黃青霉脂肪合成Anti-GPR62 Antibody人抗鈣蛋白抑抗體(ACAST-DⅣ)ELISA it
爾斯伯酵母絲聚蛋白/中間絲蛋白抗原Anti-GPR52 Antibody人抗鈣蛋白抑抗體(ACAST-DⅣ)ELISA it
釀酒酵母脂肪去飽和1Anti-GPR68 Antibody人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)
彎曲假單胞菌γ1基丁偶聯(lián)血藍(lán)蛋白Anti-GPR50 Antibody人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)
Sphingomonas yabuuchiaeγ1基丁偶聯(lián)牛血清白蛋白Anti-GPR85 Antibody人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)
假單胞菌糖原合激-3 beta(多肽)Anti-GPR75 Antibody人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)
居中克呂沃爾氏菌熒光標(biāo)記慶大霉Anti-GPR87 Antibody人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)
沙雷氏菌屬糖原合激-3α (多肽)Anti-GPR82 Antibody人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)
巴氏醋桿菌磷化糖原合激-3β (多肽)Anti-GPR87 Antibody人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)
橘青霉磷化糖原合激3α/β抗原Anti-GPRC5A Antibody人抗神經(jīng)節(jié)苷脂抗體(GM1)
可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3A1抗體蔥頭伯克氏菌人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞
肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白4抗體運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單孢菌小鼠膀胱癌細(xì)胞
胞漿蛋白SH3GL3抗體溶壁微球菌人彌漫大B淋巴瘤
AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體糞鏈球菌SV40轉(zhuǎn)化人肝上皮細(xì)胞
ALK抑制劑(Ensartinib)香蔥鏈格孢 堿式乙酸鋁
類干酪乳桿 硫酸亞錫
芽胞桿 氫氧化鋯
釀酒酵母 二硫化鉬
山西黑粉 硫酸鉍
羅倫隱球酵母 次硝酸鉍
磚紅鐮孢 次碳酸鉍
短短芽孢桿 氧化鉍
密叢毛霉 硬脂酸鋰
黏液桿屬 草酸鋰
山茶 檸檬酸鋰
酵母 乙酸鋰
琉球曲霉 硫酸鋰(一水)
紅球 磷酸鋰
香菇 偏酸鋰