以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
NEP抑制劑(AHU-377) | AHU-377 | 1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg | 1~3天 |
商品介紹:
AHU-377是有效的NEP抑制劑,IC50值為5nM。AHU-377是治療心力衰竭藥物L(fēng)CZ696的一個組分。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:149709-62-6 別名:Sacubitril 純度:99.14% 分子量:411.49 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時(shí)內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
B-細(xì)胞κ-輕肽基因增強(qiáng)子抑制因子激β(IκBKβ)ELISA Kit英文名稱:IκBKβ ELISA Kit胃癌多藥耐藥相關(guān)蛋白包裝5g
B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC1)ELISA Kit英文名稱:BLC1 ELISA Kit酪蛋白激casein kinase Iα抗體包裝1g
B-淋巴細(xì)胞激活抗原B7-2(LAB7-2)ELISA Kit英文名稱:LAB7-2 ELISA Kit磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體包裝1g
BMP結(jié)合內(nèi)皮調(diào)節(jié)因子(BMPER)ELISA Kit英文名稱:BMPER ELISA Kit磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗體包裝5g
BH3相互作用域死亡激動劑(Bid)ELISA Kit英文名稱:Bid ELISA Kit肌動蛋白調(diào)節(jié)蛋白CAPG抗體包裝5MG
Bcl2相關(guān)髓細(xì)胞白血病序列1(MCL1)ELISA Kit英文名稱:MCL1 ELISA KitⅠ型膠原/1型膠原a1抗體包裝100mg
Bcl2關(guān)聯(lián)X蛋白(Bax)ELISA Kit英文名稱:Bax ELISA KitⅢ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體包裝25mg
A類清道夫受體3(SCARA3)ELISA Kit英文名稱:SCARA3 ELISA KitCD96抗體包裝1g
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G2(ABCG2)ELISA Kit英文名稱:ABCG2 ELISA Kit貓眼綜合征染色體候選基因2抗體包裝25g
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白C6(ABCC6)ELISA Kit英文名稱:ABCC6 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框146抗體包裝5g
ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白A1(ABCA1)ELISA Kit英文名稱:ABCA1 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框150抗體包裝100g
Apelin13蛋白(AP13)ELISA Kit英文名稱:AP13 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框156抗體包裝25g
Apelin12蛋白(AP12)ELISA Kit英文名稱:AP12 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框159抗體包裝5g
Apelin蛋白(APLN)ELISA Kit英文名稱:APLN ELISA Kit1號染色體開放閱讀框162抗體包裝5mg
AMPA離子能谷受體4(GRIA4)ELISA Kit英文名稱:GRIA4 ELISA Kit1號染色體開放閱讀框163抗體包裝1g
解脂耶羅威亞酵母Yarrowia│lipolytica 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR 乙酰膽堿酯試劑盒洋川芎內(nèi)酯I;Senkyunolide
刺黑烏霉菌Memnoniella│echinata 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品乙酰膽堿受體抗體試劑盒洋川芎內(nèi)酯H;Senkyunolide
秦氏蜜環(huán)菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 質(zhì)量規(guī)格:含量960~1030µg/mg,USP30乙酰膽堿試劑盒洋川芎內(nèi)酯A;Senkyunolide
NEP抑制劑(AHU-377)外周二氮受體抗體3(R,S)-羥去氧孕烯 Ethyltriphenylphosphonium Iodide
雄激誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體3,17β-O-二(氧)雌二 1-Hexyl-2,3-dimethylimidazolium Iodide
磷化絲抗體3,2',3',4'-四乙酰炔雌 17-β-D-葡... Isopropyltriphenylphosphonium Iodide
中心粒周蛋白抗體纈草根標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 VALERIAN ROOT HP-TLC STANDARDS KIT(AHP)Human, Mouse, Rat
小鼠增殖核抗原單克抗體黑升麻植物提取物試劑盒 BLACK COHOSH BRM KIT(SH)Fusion proteins containing the HIS Tag
磷化視網(wǎng)膜母瘤樣蛋白p107抗體玉米黃質(zhì)測定試劑盒 ZEAXANTHIN METHOD VERIFICATION KIT(P)FITC
蛋白體PSMβ3抗體南非醉茄標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASHWAGANDHA STANDARDS KIT(SH)Fusion proteins containing the HA Tag
蛋白體PSMβ6抗體南非醉茄標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒 ASHWAGANDHA STANDARDS KIT(SH)Fusion proteins containing the Flag Tag
蛋白體PSMβ7抗體脂溶性維生標(biāo)準(zhǔn)品試劑盒(10種) VITAMIN STANDARDS KIT: FAT SOLUBLE(P)Fusion proteins containing the c-Myc Tag