公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:泛RAF抑制劑(TAK-632)
英文名稱:TAK-632
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
TAK-632是一種有效的泛RAF抑制劑,作用于CRAF,BRAFV600E和BRAFWT,IC50分別為1.4,2.4和8.3nM。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):1228591-30-7 純度:98.87% 分子量:554.52 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
尖孢鐮刀菌大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子Anti-TUSC2 Antibody人延伸蛋白A(EloA)
慢生根瘤菌人黃體生成釋放激Anti-TUT1 Antibody人?;さ鞍?ASP)
擴(kuò)展食烴菌大鼠活化AAnti-TWIST2 Antibody人酰化激蛋白(ASP)
泡盛曲霉人8異前列腺Anti-TWISTNB Antibody人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)
Rosetta(DE3)大鼠血管緊張ⅡAnti-TXNDC17 Antibody人殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)
腸膜明串珠菌人腎Anti-TYMP Antibody人外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)
梭菌大鼠血管緊張轉(zhuǎn)化Anti-TXNRD2 Antibody人外基質(zhì)磷糖蛋白(MEPE)
生活飲用水大腸埃希氏菌質(zhì)控樣品人腎上腺Anti-TYK2 Antibody人復(fù)制蛋白A(RPA-70)
枯草芽孢桿菌人雌二受體Anti-TYMS Antibody人復(fù)制蛋白A(RPA-70)
黏液桿菌大鼠穿孔Anti-TYMS Antibody人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)
堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌大鼠神經(jīng)肽AAnti-TYMS Antibody人軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)
馬賽菌大鼠Slit2Anti-TYR Antibody人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T活化蛋白(TAP)
猴頭菌大鼠神經(jīng)肽BAnti-U2AF1 pAb人抗原提呈相關(guān)轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/T活化蛋白(TAP)
德里腐霉豬廣譜角蛋白Anti-U2AF2 pAb人免疫抑制性蛋白(IAP)
類芽胞桿菌屬人甲狀旁腺激相關(guān)蛋白Anti-U69 Antibody人免疫抑制性蛋白(IAP)
釀酒酵母人血管緊張?jiān)?/span>Anti-UBA2 Antibody人麥角蛋白IgA(Gliadin-IgA)
泛激活2H抗體醋化醋桿菌1D14A2A10
泛蛋白連接G1抗體*紫皮口蘑(花臉香蘑)抗T淋巴細(xì)胞單克抗體7
泛蛋白連接E1抗體黑根霉菌AVND-3C8
泛化組蛋白H2AX抗體粉紅單端孢WL-3C2
泛RAF抑制劑(TAK-632)毛革蓋 馬兜鈴?fù)?/span>
類谷糠乳桿 L-乙酯鹽酸鹽
變位艾耳球蟲 牡荊內(nèi)酯
游海假交替單胞 毛地黃
灰酒紅鏈霉 BOC-D-
Bacillus aryabhattai Shivaji et al. 麥芽糖
更新世肉桿 BOC-L-
聚生殼 3-O-沒食子酰粘酸
枯草芽孢桿 β-
交鏈孢屬 木犀草-5-O-葡萄糖苷
黑曲霉 DL-
枯草芽孢桿 麥冬皂苷C
大腸埃希 麥冬皂苷A
大腸埃希 D-
寡發(fā)酵鏈球 馬兜鈴內(nèi)酰