以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
RAR激動劑(TTNPB) | TTNPB | 1mL(10mM)|10mg|50mg | 1~3天 |
商品介紹:
TTNPB是一種有效的RAR激動劑。使用人RARs進(jìn)行競爭性結(jié)合實驗中,作用于RARα,RARβ和RARγ,IC50分別為5.1nM,4.5nM和?9.3nM。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:71441-28-6 別名:Ro 13-7410;Arotinoid acid;AGN191183 純度:99.31% 分子量:348.48 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時,加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細(xì)胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
黑色附球霉大鼠β淀粉樣蛋白1-40Anti-PTHLH Antibody人蛋白磷1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)
大腸埃希氏菌大鼠周期D3Anti-PTK2B Antibody人蛋白磷1調(diào)控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)
阿伯糖乳桿菌人Ⅱ型膠原螺旋肽Anti-PThr 232 Aurora B Antibody人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)
沙漠石玉琥氏菌小鼠泛蛋白Anti-PThr 56 EEF2 Antibody人腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體G2(ABCG2)
豬苓大鼠周期D2Anti-PTPN11 Antibody人鳥苷解離抑制因子(GDI)
擬枝孢鐮孢人纖維連接相關(guān)抗原Anti-PTP4A3 Antibody人鳥苷解離抑制因子(GDI)
鏈孢囊菌小鼠αL艾杜糖苷Anti-PTPN13 Antibody人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)
食石蠟戈登氏菌小鼠αN已?;咸擒誂nti-PTPN6 Antibody人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2B)
乳桿菌屬大鼠周期D1Anti-PTPRC Antibody人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)
產(chǎn)芽孢梭菌(生孢梭菌)人胃泌抗體Anti-PTPRJ Antibody人八聚體轉(zhuǎn)錄因子(OTF2A)
秀珍菇人谷脫氫Anti-PTPRZ1 Antibody人脫氧尿三磷(DUTP)
光滑鏈霉菌小鼠α甘露糖苷Anti-PTPRN2 Antibody人脫氧尿三磷(DUTP)
釀酒酵母大鼠髓磷脂堿性蛋白Anti-PVR Antibody人協(xié)同激分子受體(CMR)
釀酒酵母人肝輔因子ⅡAnti-PVALB Antibody人協(xié)同激分子受體(CMR)
豬屎豆根瘤菌大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白Anti-PTTG1IP Antibody人肽聚糖(PG)
乙鈣不動桿菌小鼠膜聯(lián)蛋白ⅤAnti-PWWP2B Antibody人肽聚糖(PG)
Tau微管蛋白激2抗體針葉樹散斑殼人小細(xì)胞系肺癌細(xì)胞
谷酰胺轉(zhuǎn)胺6抗體松針散斑殼兔乳腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基:
共濟(jì)失調(diào)蛋白8抗體四川散斑殼大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化)
跨膜蛋白59樣蛋白抗體黃白側(cè)耳(姬菇)人食管癌細(xì)胞
RAR激動劑(TTNPB)木蹄層孔 FMOC-L-苯
中國臺灣根霉 FMOC-L-
豌豆根瘤 FMOC-D-
黃海芽胞桿 CBZ-D-色
Roseomonas CBZ-L-色
枯草芽孢桿 CBZ-L-絲
Microbacterium flavum CBZ-L-亮
琥珀毛殼 CBZ-D-脯
蟬花 CBZ-L-脯
大紫菇 CBZ-L-羥脯
棲熱屬 CBZ-甘
蚜蟲莫氏黑粉 CBZ-DL-苯
猴頭 CBZ-D-天冬
毛栓孔 CBZ-L-天冬
幽門螺旋桿 CBZ-D-谷