鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)

鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)公司*的產(chǎn)品：Anti-GRM2/FITC 熒光素標(biāo)記代謝型谷氨酸受體2IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-phospho-P53 (Ser6)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化抑制基因P53抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Bestroph

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)

英文名稱：PD 151746

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磺加貝酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Glimepiride鈣粘附蛋白8抗體包裝1g

磺羅（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Griseofulvin;Fulcin6號(hào)染色體開放閱讀框174抗體包裝5g

磺帕珠沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Griseofulvin6號(hào)染色體開放閱讀框150抗體包裝25g

磺培沙星（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sodium hyaluronateX染色體開放閱讀框56抗體包裝5g

磺齊拉西（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hydrocortisone9號(hào)染色體開放閱讀框152抗體包裝25g

磺伊馬替尼（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Hydrocortisone6號(hào)染色體開放閱讀框58抗體包裝5g

基斑蝥（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ibutilide fumarate 接觸蛋白相關(guān)蛋白4抗體包裝1g

基丁香酚（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ibutilide fumarate CD24抗體包裝1g

基原薯蕷皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Isepamicine Sulphate接觸蛋白相關(guān)蛋白3抗體包裝100g

硫二馬尼(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： BexaroteneCD24抗體包裝25g

硫新斯的明(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Bexarotene限局性核因子3抗體包裝1g

巰咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ketoprofen胰羧肽A6抗體包裝250mg

巰咪唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ketoprofen9號(hào)染色體開放閱讀框150抗體包裝5g

硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ketotifen fumarate鈣粘附蛋白9抗體包裝1g

硝唑雜質(zhì)A（2-基-5-硝基咪唑）標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱： Ketotifen fumarate鈣粘蛋白15抗體包裝5g

: ＝AS3.951資源名稱: 米曲霉 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP腺苷環(huán)化1試劑盒五味子乙;Schisandrin B

: 75-049資源名稱: 非O1群霍亂弧菌 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G2試劑盒土克甾;Turkesterone

蘇云金芽孢桿菌Bacillus│thuringiensis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,USP32腺苷三磷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1試劑盒土貝母皂苷乙;TubeiMoside I
鈣蛋白酶抑制劑(PD 151746)硝唑偶聯(lián)血藍(lán)蛋白穿山龍（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

三聚與雞卵白蛋白偶聯(lián)物穿心蓮（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

神經(jīng)元特異性烯化抗原穿心蓮內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

Nogo-66 (1-40)船形烏頭（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

神經(jīng)肽 Y（1-36）垂盆草（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

神經(jīng)保護(hù)肽椿皮（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽慈溪麥冬皂苷AHuman

土霉偶聯(lián)牛血清白蛋白次野鳶尾黃（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

土霉偶聯(lián)雞卵白蛋白甘草查爾(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)